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<article-title xml:lang="es"><![CDATA[Alargamiento de la vida de anaquel de las frutas por el uso de biopelículas]]></article-title>
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<abstract abstract-type="short" xml:lang="en"><p><![CDATA[Abstract One of the main problems in fruit preservation is its short shelf life, a detrimental fact that causes incalculable losses to the food industry. Take, for example, strawberries, blackberries and raspberries, time-labile fruits with a high market demand due to their nutritional properties (antioxidants, minerals and organic acids). One of the alternatives that exist to extend the shelf life of fruits is the use of edible covers or biofilms. These can be composed of hydrocolloids, proteins, lipids or a combination of all three, each material gives specific properties to these coatings. The qualities of biofilms, when applied in the perpetuation of shelf life of fruits, are the reduction of water loss, the loss of phenolic compounds and the retardation of enzymatic oxidation, in addition to allowing the addition of antioxidants or antimicrobial, without affecting the organoleptic properties of the fruit.]]></p></abstract>
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<kwd lng="es"><![CDATA[Biopelículas]]></kwd>
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</front><body><![CDATA[ <p align="right"><font color="#800000" size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><a href="https://doi.org/10.34098/2078-3949.37.1.2" target="_blank">https://doi.org/10.34098/2078-3949.37.1.6</a></font><font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">    <br>     <strong>BREVE RESE&Ntilde;A</strong></font></p>     <p align="right">&nbsp;</p>     <p align="center"><font size="4" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"><strong>Alargamiento  de la vida de anaquel de las frutas por     <br> el uso de biopel&iacute;culas</strong></font></p>     <p align="center">&nbsp;</p>     <p align="center"><font size="3" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif"> <strong>Elongation of shelf life of fruits by the use     <br> of biofilms</strong></font></p>     <p align="center">&nbsp;</p>     <p align="center">&nbsp;</p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p align="center"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><strong>Jesús A. Aguilar-Duran<sup>1</sup>, Israel García León<sup>2</sup>, Jesús Di Cario Quiroz Velásquez<sup>2,*</sup></strong></font>    <br>     <font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><sup>1</sup> Laboratorio de Biomedicina Molecular, Centro de Biotecnología Genómica del Instituto Politécnico Nacional.     <br>   Boulevard del Maestro s/n esq. Elias Pina, Col. Narciso Mendoza, Cd. Reynosa, Tamaulipas México, C.P.</font>    <br>   <font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><sup>2 </sup>Laboratorio de Biotecnología Experimental, Centro de Biotecnología Genómica del Instituto Politécnico Nacional.     <br>   Boulevard del Maestro s/n esq.     Elias Pina, Col. Narciso Mendoza, Cd. Reynosa, Tamaulipas México, C.P. 88710</font>    <br>     <font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">* Corresponding author: <a href="mailto:iguiroz@ipn.mx">iguiroz@ipn.mx</a></font>    <br>   <font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><strong>Received</strong> 12 30 2019 <strong>Accepted</strong> 04 2 2 2020 <strong>Published</strong> 04 30 2020</font></p>     <p align="justify">&nbsp;</p>     <p align="justify">&nbsp;</p> <hr>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><b>Resumen</b></font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Uno de los principales problemas en la conservaci&oacute;n de frutas es su corta vida de anaquel, hecho perjudicial que ocasiona incalculables p&eacute;rdidas a la industria alimenticia. T&oacute;mese como ejemplo, fresas, zarzamoras y frambuesas,</font> <font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">frutos l&aacute;biles en el tiempo con una alta demanda en el mercado debido a sus propiedades nutricionales (antioxidantes, minerales y &aacute;cidos org&aacute;nicos). Una de las alternativas que existen para alargar la vida de anaquel de las frutas es el uso de cubiertas comestibles o biopel&iacute;culas. Estas pueden estar compuestas por hidrocoloides, prote&iacute;nas, l&iacute;pidos o una combinaci&oacute;n de los tres, cada material otorga propiedades especificas a estos recubrimientos. Las cualidades de las biopel&iacute;culas, cuando son aplicadas en la perpetuaci&oacute;n de la vida de anaquel de las frutas, son la reducci&oacute;n de la perdida de agua, la perdida de compuestos fen&oacute;licos y la retardaci&oacute;n de la oxidaci&oacute;n enzim&aacute;tica, adem&aacute;s de permitir la adici&oacute;n de antioxidantes o antimicrobianos, sin afectar las propiedades organol&eacute;pticas de la fruta.</font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><b>Palabras Clave: </b><i>Biopel&iacute;culas, Cubiertas comestibles, Tipos de biopel&iacute;culas.</i></font></p> <hr>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><b>Abstract</b></font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">One of the main problems in fruit preservation is its short shelf life, a detrimental fact that causes incalculable losses to the food industry. Take, for example, strawberries, blackberries and raspberries, time-labile fruits with a high market demand due to their nutritional properties (antioxidants, minerals and organic acids). One of the alternatives that exist to extend the shelf life of fruits is the use of edible covers or biofilms. These can be composed of hydrocolloids, proteins, lipids or a combination of all three, each material gives specific properties to these coatings. The qualities of biofilms, when applied in the perpetuation of shelf life of fruits, are the reduction of water loss, the loss of phenolic compounds and the retardation of enzymatic oxidation, in addition to allowing the addition of antioxidants or antimicrobial, without affecting the organoleptic properties of the fruit.</font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><b>Keywords: </b><i>Biofilms, Edible covers, Types of biofilms. </i></font></p> <hr>     <p align="justify">&nbsp;</p>     <p align="justify">&nbsp;</p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="3"><b>INTRODUCCIÓN</b></font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Cada año en todo el mundo se pierden cantidades masivas de alimentos debido al deterioro y la infestación de la comida en el transporte hacia el consumidor. Estas pérdidas representan un desperdicio de los recursos usados en la producción, como ser tierra, agua, energía y maquinaria [1]. La reducción de las pérdidas conlleva una mejora en la productividad alimenticia [2].</font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">La causas de estas pérdidas son variadas, dependiendo del desarrollo económico del país. En países ricos los alimentos se desperdician en gran medida debido a los hábitos del consumidor que obedecen a los altos estándares de calidad fijados por reparticiones similares a la FDA de Estados Unidos y que son obligatorios en centros de abastecimiento y consumo como los supermercados por ejemplo. Dichos estándares elevados ocasionan que frutas aún consumibles, pero que no cumplen con los criterios de apariencia como forma, color y peso, y que ostentan un periodo de vida de anaquel estrecho (grado de inmediatez de la fecha de caducidad) sean desechados. En países de bajos ingresos, las pérdidas se deben a limitaciones financieras y tecnológicas, como las técnicas de cosecha, almacenamiento, infraestructura y envío. Su impacto en la seguridad alimenticia del país es evidente [3].</font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">El proceso de empaque de algunas frutas juega un papel fundamental en el alargamiento de la vida de anaquel de las mismas, el momento de transportarlas y ofrecerlas a la venta. El ejemplo de las berries es muy apropiado para describir tal situación. Dada la magnitud del problema de la descomposición alimentaria por procesos de empaque inapropiados, es importante la búsqueda de alternativas o complementos para aumentar la vida de anaquel de los alimentos con el fin de preservar su calidad. Las biopelículas o cubiertas comestibles son una alternativa promisoria para solventar esta problemática. Estas han sido evaluadas y se ha probado su efectividad para prolongar el tiempo de vida de anaquel de ciertas frutas. Estas biocubiertas de empaquetamiento presentan además la ventaja del uso de materiales biodegradables, en contraste con macromoléculas de origen sintético (plásticos).</font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Estas biopelículas actúan como barreras físicas sobre la superficie de la fruta disminuyendo la permeabilidad al O<sub>2</sub>, CO<sub>2</sub> y vapor de agua, retardando las reacciones metabólicas asociadas con la maduración fisiológica e inhibiendo el apareamiento enzimático, preservando su textura y sabor, permitiendo incrementar la vida útil de la fruta [4].</font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Estas cubiertas pueden ser portadoras de aditivos como antioxidantes, antimicrobianos, nutrientes, etc. ayudando a preservar o incluso a mejorar la calidad de las frutas [5].</font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">El uso de biopelículas o recubrimientos para frutas es una tecnología aplicada desde hace algunos años. Actualmente se presenta como una alternativa con gran potencial debido a la necesidad del consumo de alimentos saludables y la prolongación del tiempo de vida de anaquel. El objetivo de esta revisión es presentar los tipos de recubrimientos utilizados en la preservación de frutas, así como sus técnicas de evaluación y su efecto en las cualidades organolépticas de las mismas.</font></p>     <p align="justify">&nbsp;</p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="3"><b>TIPOS DE RECUBRIMIENTOS USADOS EN FRUTAS</b></font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Un recubrimiento comestible debe de ser inocuo para el consumidor evitando causar algún problema de salud. Éstos pueden estar compuestos por hidrocoloides (polisacáridos o proteínas), compuestos hidrofóbicos (lípidos o ceras) o una combinación de ambos, lo cual permite aprovechar las propiedades de cada compuesto y la sinergia entre ellos.</font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Dependiendo de las sustancias empleadas en los recubrimientos, éstas determinarán las propiedades mecánicas y de barrera con respecto al vapor de agua, oxígeno y dióxido de carbono atmosféricos [6].</font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><i><strong>Hidrocoloides</strong></i></font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Los hidrocoloides son un grupo heterogéneo de polímeros de cadena larga (polisacáridos y proteínas) que se caracterizan por su propiedad de formar dispersiones viscosas y/o geles cuando son aplicados en agua [7].</font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Los hidrocoloides pueden ser de origen animal, vegetal, microbiano o sintético, comportándose como polímeros hidrofílicos. Presentan grupos hidroxilo y pueden ser polielectrolitos como el alginato, carragenano, pectina, carboximetilcelulosa, xantano o goma arábica [7,8]. Actualmente, los hidrocoloides son usados ampliamente como soluciones formadoras de recubrimientos para proteger y controlar el color, sabor, textura y extender la vida de anaquel en frutas y verduras [4,9-11]. Poseen excelentes propiedades de barrera hacia los gases (O<sub>2</sub> y CO<sub>2</sub>) generando una atmosfera modificada la cual extiende la vida útil de las frutas sin formar condiciones anaeróbicas. Debido a su naturaleza hidrofílica, este tipo de recubrimientos no posee buenas cualidades de protección contra la humedad [13].</font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Sin embargo, es posible mejorar las propiedades mecánicas (resistencia, dureza y ductilidad) mediante la adición de surfactantes, aumentando la resistencia al vapor de agua [14].</font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><i><strong>Proteínas</strong></i></font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Los recubrimientos a base de proteínas pueden ser derivados de animales o plantas. Entre las proteínas usadas se encuentran la albúmina de huevo, el colágeno, la zeína (maíz), el gluten (trigo), etc., destacándose las proteínas presentes en la leche (caseína y suero) como las más nutritivas, además de ser un excelente componente en la preparación de recubrimientos en comparación de otras fuentes alimenticias [15].</font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Los recubrimientos a base de proteínas proporcionan una excelente barrera hacia los aromas, aceites y oxígeno proporcionando propiedades mecánicas (resistencia, dureza y ductilidad) haciéndolos muy favorables para recubrir alimentos. Pero no son una barrera efectiva en contra la humedad debido a su naturaleza hidrofílica [16-17].</font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Una ventaja que presentan estos recubrimientos es que son producidos a partir de recursos naturales y son degradados con mayor facilidad que otros tipos de polímeros [13].</font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><i><strong>Lípidos</strong></i></font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Los lípidos son usados como recubrimientos o son incorporados a biopolímeros para formar películas compuestas, proporcionando una excelente barrera contra el vapor de agua gracias a su baja hidrofilia [18].</font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Los compuestos a base de lípidos son aplicados como películas protectoras a partir de ceras de plantas (caña de azúcar, candelilla, carnauba, etc.), monoglicéridos acetilados y surfactantes [19].</font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Estas biopelículas tienen un comportamiento variable contra la transferencia de humedad dependiendo de sus propiedades. Los ácidos grasos insaturados son menos eficientes para controlar la humedad debido a su mayor polaridad en comparación con los ácidos saturados. Las ceras, al estar compuestas de ácidos alifáticos de cadena larga presentan mayor resistencia a la difusión de agua que otros materiales debido a su bajo contenido de grupos polares [20].</font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Los recubrimientos a base de aceite, grasa y cera no se aplican fácilmente a la superficie de las frutas y verduras debido a su consistencia y grosor [21].</font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><i><strong>Compuestos</strong></i></font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Los recubrimientos compuestos son creados con el objetivo de complementar las ventajas de cada tipo de componente, así como de minimizar sus desventajas. Estos pueden ser creados con una combinación de proteínas, polisacáridos y lípidos [22]. Los polisacáridos y proteínas poseen una menor permeabilidad que los líquidos a los gases; su empleo es útil para reducir las tasas de respiración, mientras que los lípidos reducen la desecación de la fruta [23]. Las biopelículas o coberturas comestibles se pueden producir como biocapas o emulsiones estables. En los recubrimientos compuestos por doble capa el lípido forma una segunda capa sobre la capa de polisacárido o proteína. Por otro lado, en las biopelículas compuestas el lípido se dispersa y queda atrapado en la matriz del biopolímero de soporte [24].</font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"><i><strong>Aditivos</strong></i></font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Las funciones mecánicas, funcionales, organolépticas y características nutricionales de las biopelículas pueden ser modificadas y  mejoradas  con la incorporación de  distintos  tipos  de  aditivos  (plastificantes,  surfactantes,</font> <font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">antimicrobianos, etc.) [25]. La función principal de los plastificantes es la de aumentar las propiedades mecánicas (volumen libre o movilidad molecular de los polímeros, otorgar flexibilidad y reducir la fragilidad) siendo mezclados con la solución del recubrimiento [26]. El agua es un plastificante natural y efectivo, aunque su efecto es difícil en los biopolímeros hidrofílicos. La adición de plastificantes hidrofílicos como: glicerol, ácidos grasos, sorbitol y polietilenglicol generalmente promueven la permeabilidad al vapor de agua e influye en las propiedades mecánicas [8,17].</font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">La principal función de un surfactante es la de aumentar la humectabilidad y mejorar la adhesión del material de recubrimiento, además de disminuir la perdida de humedad cuando son incorporados a la formulación del recubrimiento [27].</font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">A diferencia de una aplicación directa de antimicrobianos y antioxidantes en alimentos, la adición de estos en los recubrimientos y películas permiten la liberación gradual y mantienen una concentración en un tiempo prolongado. Estos puede llegar a afectar propiedades organolépticas debido a su fuerte sabor originado por el contenido de compuestos fenólicos [28].</font></p>     <p align="justify">&nbsp;</p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="3"><b>TÉCNICAS DE EVALUACIÓN</b></font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Con el propósito de asegurar la calidad y la efectividad de los productos es necesario llevar a cabo una evaluación de las distintas formulaciones (Figura 1).</font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p align="center"><img src="/img/revistas/rbq/v37n1/a06_figura01.gif" width="719" height="369"></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Una de las principales características analizadas en estas pruebas es la evaluación de la perdida de agua, la cual ocurre mediante la transpiración de la fruta, y ésta determina el grado de efectividad de la cubierta como barrera contra la humedad. Cuando existe una pérdida de agua, ésta se ve reflejada en la reducción de peso en la fruta. Además de afectar el color y la textura, se observan cambios más drásticos cuando se alcanza el umbral de perdida de humedad en la turbidez, firmeza y decoloración. Pudiendo ocurrir una disminución de características nutricionales y organolépticas. Generalmente, cuando la perdida de humedad es &lt;3% no se observan efectos negativos, mientras que si es &gt;5% comienza a afectarse la calidad visual, además de comenzar a marchitarse [30].</font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Otro de los elementos evaluados es la acidez titulable, la cual es dependiente de los ácidos orgánicos presentes en las frutas, en general aumenta con la maduración y ésta se determina por potenciometría [31].</font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Los sólidos solubles totales aumentan a la par del crecimiento fisiológico de la fruta. Su determinación se realiza por medio de un refractómetro, reportándose en &deg;Bx (grados Brix). Durante el proceso de almacenamiento, es esperado un pequeño aumento de los sólidos solubles en relación con el tiempo de vida de anaquel [32].</font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Otro de los valores que varía con la maduración fisiológica es el pH, sus valores dependen de la naturaleza de la fruta (acidas, semiácidas, dulces o neutras). Se mide por potenciometría [33].</font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Además de las vitaminas y minerales en los alimentos, los compuestos fenólicos tienen efectos positivos en la salud. Estos compuestos aumentan según el desarrollo de la fruta, aunque después de la maduración se observa un descenso de los mismos. El perfil de estos compuestos es característico de cada fruta, pudiendo ser determinados por cromatografía (HPLC) [34].</font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">El color es una de las principales características de importancia económica en las frutas. Éste es caracterizado en la superficie mediante un colorímetro. Esta característica es de suma importancia en el consumidor ya que proporciona una percepción de calidad en la fruta [5].</font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Los compuestos volátiles juegan un rol importante en las propiedades organolépticas (sabor y aroma). Estos se encuentran compuestos principalmente de esteres, alcoholes, aldehidos, cetonas, lactonas, terpenoides y apocarotenoides. Siendo evaluados mediante cromatografía de gases [35].</font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">La textura es usada como un índice de calidad organoléptica, tanto en frutas frescas como procesadas. Esta depende de los organelos celulares y constituyentes bioquímicos, siendo afectada cuando ocurren cambios en la química de la celulosa, pectina o hemicelulosa. La cual es evaluada mediante analizadores de textura [36].</font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Además de realizar un análisis sobre las propiedades organolépticas, se debe llevar a cabo una evaluación microbiana con el fin de asegurar la inocuidad del producto final. Esto, debido a que los productos frutícolas son susceptibles a alteraciones patológicas llevadas a cabo por hongos y menormente levaduras, ocasionando pérdidas debido a las alteraciones en las propiedades organolépticas además de afectar negativamente la calidad visual [37].</font></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p align="justify">&nbsp;</p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="3"><b>CONCLUSIONES</b></font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Los recubrimientos comestibles o biopelículas han demostrado poder aumentar la estabilidad de frutas frescas y mínimamente procesadas, retrasando el proceso de maduración post cosecha, manteniendo las cualidades organolépticas y nutricionales y por lo tanto su calidad, además de ser seguras y amigables con el medio ambiente debido a la naturaleza biodegradable de sus componentes.</font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Estas biopelículas pueden estar compuestas por polisacáridos, proteínas, lípidos o una mezcla de ellos, además de ser posible el adicionamiento de agentes antimicrobianos o antioxidantes mejorando las formulaciones.</font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">De acuerdo con esta revisión, las cubiertas comestibles extienden la vida de anaquel, reducen la perdida de agua y humedad, retrasan el proceso de maduración y previenen el crecimiento microbiano gracias a la aplicación de aditivos.</font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">A pesar de los grandes beneficios otorgados por las cubiertas comestibles, la aplicación de esta tecnología sigue siendo limitada, además de ser necesaria una mejora en las propiedades mecánicas y de barrera.</font></p>     <p align="justify">&nbsp;</p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="3"><b>AGRADECIMIENTOS</b></font></p>     <p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Los autores agradecen al Instituto Politécnico Nacional - Centro de Biotecnología Genómica, al proyecto SIP Multidisciplinario 20195632 por el financiamiento económico otorgado además al programa BEIFI-IPN por el apoyo económico otorgado al estudiante Aguilar-Duran Jesús Alejandro. Al programa EDI - IPN, del cual el Dr. Jesús Di Cario Quiroz Velásquez es becario.</font></p>     <p align="justify">&nbsp;</p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="3"><b>REFERENCIAS</b></font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">1.&nbsp; &nbsp;FAO, Food and Agricultura Organisation of the United Nations. 2011, <i>Global food losses and waste: Extent, Causes and Prevention.</i></font> <font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Reducing Losses and Extending Availability of Fruits and Vegetables, The U.S. Government's Global Hunger and Food Security Initiative. California, United States of America.</font> <font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2" color="#0000E4"><u><a href="https://horticulture.ucdavis.edu/sites/g/files/dgvnskl816/files/extension material files/mitcham-reducing-losses-fruits-vegetables.pdf" target="_blank">https://horticulture.ucdavis.edu/sites/g/files/dgvnskl816/files/extension material files/mitcham-reducing-losses-fruits-vegetables.pdf</a></u>. </font><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">Acces date: October 2019</font><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"></font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=698763&pid=S0250-5460202000010000600001&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">2.&nbsp; &nbsp;Kiaya, V. 2014, Post-harvest losses and strategies to reduce them, <i>J. Agrie. Sci., 149(3-4), </i>9-57.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=698764&pid=S0250-5460202000010000600002&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">3.&nbsp; &nbsp;Olivas, G.I., Dávila-Aviña, J.E., Salas-Salazar, N.A., Molina, F.J. 2008, Use of edible coatings to preserve the quality of fruits and vegetables during storage, <i>StewartPostharvest Rev., 4(3).</i></font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=698765&pid=S0250-5460202000010000600003&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">4.&nbsp; &nbsp;Olivas, G.I., Rodríguez, J.J., Barbosa-Cánovas, G.V. 2003, Edible coatings composed of methylcellulose, stearic acid, and additives to preserve quality of pear wedges, <i>J. FoodProcess. Preserv., 27(4), </i>299-320.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=698766&pid=S0250-5460202000010000600004&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">5.&nbsp; &nbsp;Guilbert, S., Gontard, N., Gorris, L.G.M. 1996, Prolongation of the shelf-life of perishable food producís using biodegradable films and coatings, <i>LWT - Food Science and Technology, 29 </i>(1-2), 10-17.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=698767&pid=S0250-5460202000010000600005&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">6.&nbsp; &nbsp;Milani, J.,   Maleki, G. 2012, Hydrocolloids in Food Industry, <i>Food Industrial Processes </i>- <i>Methods and Equipment, </i>Benjamín Valdez,   IntechOpen,   DOI:    10.5772/32358.   Available   from:   <a href="https://www.intechopen.com/books/food-industrial-processes-methods-and-equipment/hydrocolloids-in-food-industry" target="_blank">https://www.intechopen.com/books/food-industrial-processes-<u>methods-and-equipment/hydrocolloids-in-food-industry</u></a></font> <font size="2" face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif">Acces date: 12/01/2019</font> &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=698768&pid=S0250-5460202000010000600006&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">7.&nbsp; &nbsp;Raghav, P.K., Agarwal, N., Saini, M., Vidhyapeeth, J., Vidhyapeeth, J. 2016, Edible Coating of Fruits and Vegetables, / <i>nternationalJ. Sci. Mod. Educ, 1( </i>1), 188-204.</font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">8.&nbsp;&nbsp; Parreidt, T.S., Müller, K., Schmid, M. 2018, Alginate-based edible films and coatings for food packaging applications, <i>Foods, </i>7(10), 1-38.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=698770&pid=S0250-5460202000010000600008&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">9.&nbsp;&nbsp; Moayednia, N., Ehsani, M.R., Emamdjomeh, Z., Asadi M.M., Mizani, M., Mazaheri, A.F. 2010, A note on the effect of calcium alginate coating on quality of refrigerated strawberries, <i>IrishJ. Agrie. Food Res., 49(2), </i>165-170.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=698771&pid=S0250-5460202000010000600009&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">10.&nbsp; &nbsp;Phillips, G.O. Williams, P.A. <i>Introduction tofood hydrocolloids, </i>In: <i>Handbook ofhydrocolloids, </i>Woodhead Publishing Series in Food Science, Technology and Nutrition, 2009, Elsevier Science B.V., Amsterdam, Netherlands, 2<sup>ntl</sup> edition, 1-22.</font></p>     <!-- ref --><p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">11.&nbsp; &nbsp;Zapata, P.J., Guillen F., Martínez-Romero, D., Castillo, S., Valero, D., Serrano, M. 2008, Use of alginate or zein as edible coatings to delay postharvest ripening process and to maintain tomato <i>(Solanum lycopersicon </i>Mili) quality, <i>J. Sci. Food Agrie., 88, </i>1287-1293.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=698773&pid=S0250-5460202000010000600011&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">12.&nbsp; &nbsp;Baldwin, E.A., Nisperos-Carriedo, M.O., Baker, R.A. 1995, Use of edible coatings to preserve quality of lightly (and slightly) processed producís, <i>Crit. Rev. Food Sci. Nutr., 35(6), </i>509-524.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=698774&pid=S0250-5460202000010000600012&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">13.&nbsp; &nbsp;Chambi, H. Grosso, C. 2011, Effect of surfactants onthe functional properties of gelatin-polysaccharide-based films, <i>Eur. Food Res. Technol, 32,(1), </i>63-69.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=698775&pid=S0250-5460202000010000600013&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">14.&nbsp; &nbsp;Shendurse, A. 2018, Milk protein based edible films and coatings-preparation, properties and food applications, <i>J. Nutr. Heal. FoodEng., 8(2), </i>219-226.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=698776&pid=S0250-5460202000010000600014&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">15.&nbsp; &nbsp;Gennadios, A. Weller, C.L., 1990, Edible films and coatings from wheat and corn proteins, <i>Food Technol, 44 </i>(10), 63-69.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=698777&pid=S0250-5460202000010000600015&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">16.&nbsp; &nbsp;Krochta, J.M., Mulder, J., 1997, Edible and biodegradable polymer films: Challenges and Opportunities, <i>Food Technol., 51(2), </i>61-74.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=698778&pid=S0250-5460202000010000600016&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">17.&nbsp; &nbsp;De Azeredo, H.M.C. <i>Edible coatings, </i>In: <i>Advances in Fruit Processing Technologies, </i>2012, CRC Press, Boca Ratón, USA, 345-362.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=698779&pid=S0250-5460202000010000600017&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">18.&nbsp; &nbsp;Hassan, B., Chatha, S.A.S., Hussain, A.I., Zia, K.M., Akhtar, N. 2018, Recent advances on polysaccharides, lipids and protein based edible films and coatings: A review, <i>Int. J. Biol. Macromol., 109, </i>1095-1107.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=698780&pid=S0250-5460202000010000600018&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">19.&nbsp; &nbsp;Morillon. V., Debeaufort. F., Blond. G., Capelle M., Voilley A. 2002, Factors affectingthe moisture permeability of lipid-based edible films: A review, <i>Crit. Rev. Food Sci. Nutr., 42(1), </i>67-89.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=698781&pid=S0250-5460202000010000600019&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">20.&nbsp; &nbsp;Robertson, G.L. Food Packaging Principies and Practice, CRC Press, 3th Edition, 2012, Boca Ratón, USA.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=698782&pid=S0250-5460202000010000600020&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">21.&nbsp; &nbsp;Donhowe O., Fennema., O. <i>Edible films and coatings: characteristics, formation, definitions, and testing methods, </i>In: <i>Edible coatings and Films to Improve food Quality, </i>ed by Krochta, J.M., Baldwin, E.A., Nísperos-Carrido, M., 1994, CRC Press, Boca Ratón, USA, 1-24.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=698783&pid=S0250-5460202000010000600021&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">22.&nbsp; &nbsp;Phan, D., Debeaufort, F., Luu, D., Voilley, A. 2008, Moisture barrier, wetting and mechanical properties of shellac/agar or shellac/cassava starch bilayer bio-membrane for food applications, <i>J. Memb. Sci., 325(1), </i>277-283.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=698784&pid=S0250-5460202000010000600022&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">23.&nbsp; &nbsp;Perez-Gago, M.B., Serra, M., Río, M.A.D. 2006, Color change of fresh-cut apples coated with whey protein concentrate-based edible coatings, <i>Postharvest Biol. Technol, 39(1) </i>84-92.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=698785&pid=S0250-5460202000010000600023&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">24.&nbsp; &nbsp;Silva-Weiss, A.,  Sobral, P.J.A., Gómez-Guillen, M.C., Bifani, V. 2013, Natural Additives in Bioactive Edible Films and Coatings: Functionality and Applications in Foods, <i>Food Engineering Reviews, 5, </i>200-216.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=698786&pid=S0250-5460202000010000600024&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">25.&nbsp; &nbsp;Guilbert, S., Gontard, N., Cuq, B. 1995, Technology and applications of edible protective films, <i>Packag. Technol. Sci. 8, </i>339-346.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=698787&pid=S0250-5460202000010000600025&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">26.&nbsp; &nbsp;Baldwin, E.A., Nisperos-Carriedo, M.O., Baker, R.A., 1995, Use of Edible Coatings to Preserve Quality of Lightly (and Slightly) Processed Products, <i>Crit. Rev. Food Sci. Nutr., 35(6), </i>509-524.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=698788&pid=S0250-5460202000010000600026&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">27.&nbsp; &nbsp;Lü, F., Ye, X.D., Liu, D.H., 2009, Review of antimicrobial food packaging, <i>Nongye Jixie Xuebao/Transactions Chínese Soc. Agrie. Mach., 40 (6), </i>138-142.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=698789&pid=S0250-5460202000010000600027&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">28.&nbsp; &nbsp;Ali, L. Tesis de grado, Pre-harvest factors affecting quality and shelf-life in raspberries and blackberries <i>(Rubus spp. L.), </i>Swedish University of Agricultural Sciences, Alnarp, Sweden, 2012.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=698790&pid=S0250-5460202000010000600028&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">29.&nbsp; &nbsp;Holcroft, D. 2015, Water Relations in Harvested Fresh Produce, <i>Postharvest Educ. Found. WhitePap., 15, </i>1-16.</font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=698791&pid=S0250-5460202000010000600029&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p align="justify"><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2">30.&nbsp; &nbsp;Anthon, G.E., Lestrange, M., Barrett, D.M. 2011, Changes in pH, acids, sugars and other quality parameters during extended vine holding of ripe processing tomatoes, <i>J. Sci. 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O., 2008, Fungi, quality and safety issues in fresh fruits and vegetables,&quot; <i>Journal of Applied Microbiology, 104, </i>1239-1243.</font><font face="Verdana, Arial, Helvetica, sans-serif" size="2"></font>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=698798&pid=S0250-5460202000010000600036&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><p align="justify">&nbsp;</p>     <p align="justify">&nbsp;</p>      ]]></body><back>
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