Nota de Investigación
Actividad biocida del extracto crudo etanólico crudo del Piper elongatum “Matico” en cervicitis en mujeres en edad fértil, como alternativa terapéutica
Biocidal activity of the crude ethanol extract of Piper elongatum “Matico” in cervicitis in women of childbearing age, as a therapeutic alternative
Rodríguez-Lizana Maritza, Ochoa-Yupanqui Walter Wilfredo*
Universidad Nacional de San Cristóbal de Huamanga. Facultad de Obstetricia. Portal Independencia No. 57 Huamanga-Ayacucho-Perú. Tel: (066)312510 – (066)312230 Móvil: 966100450 - (066)526011 Maritzarl2008@hotmail.com
]]> *Dirección de contacto: Universidad Nacional de San Cristóbal de Huamanga. Facultad de Ciencias Biológicas. Portal Independencia N° 57 Huamanga – Ayacucho Tel: (066)312510-(066)312230 Movil: 966881161Walter Wilfredo Ochoa-Yupanqui E-mail address: wwalter8a@hotmail.com
Historial del artículo.
Recibido agosto 2019.
Devuelto septiembre 2019.
Aceptado noviembre 2019.
Disponible en línea, febrero 2020.
Resumen
]]> La investigación tuvo como objetivo, determinar la actividad biocida del extracto crudo etanólico del Piper elongatum (Matico) de cervicitis en mujeres en edad fértil, de una población fue de 250 mujeres en edad fértil, 50 mujeres con diagnóstico de cervicitis aguda (34) y crónica (16), con edad promedio de 38 años, conformando grupos control y caso por 25 mujeres. Como instrumento se utilizó la hoja de entrevista estructurada, resultados de PAP y resultados de exámenes de laboratorio. Se lograron resultados alentadores 29.4% de las mujeres con cervicitis aguda recibieron el tratamiento con extracto crudo etanólico de matico al 1% se aliviaron frente al 20.6% del grupo control (X2: 4.37, p=0.037), mientras las mujeres diagnosticadas con cervicitis crónica, tratadas con extracto crudo etanólico al 5%, se aliviaron el 50% y ninguna en el grupo control, lo que indica que hay efectividad del extracto crudo etanólico de matico (X2: 7.27, p=0.007). Se concluye que los componentes bioactivos presentes en el extracto crudo etanólico tienen actividad biocida sobre la cervicitis aguda y crónica.Palabras clave: Cervicitis, Piper elongatum “matico”, actividad biocida, mujeres en edad fértil, terapéutica, extracto etanólico.
Abstract
The objective of the research was to determine the biocidal activity of the ethanolic crude extract of the Piper elongatum (matico) of cervicitis in women of childbearing age, of a population was 250 women of childbearing age, 50 women with a diagnosis of acute cervicitis (34) and chronic (16), with an average age of 38 years, forming control and case groups for 25 women. The structured interview sheet, PAP results and laboratory test results were used as an instrument. Encouraging results were achieved 29.4% of women with acute cervicitis received treatment with 1% matico ethanolic crude extract were relieved against 20.6% of the control group (X2: 4.37, p = 0.037), while women diagnosed with chronic cervicitis, treated with 5% ethanolic crude extract, 50% were relieved and none in the control group, indicating that there is effectiveness of the matico ethanolic crude extract (X2: 7.27, p=0.007). It is concluded that the bioactive components present in the ethanolic crude extract have biocidal activity on acute and chronic cervicitis.
Key words: Cervicitis, Piper elongatum, "matico", biocidal activity, women of childbearing age, therapeutic, ethanolic extract.
Introducción
Las infecciones como causa de morbilidad en los servicios de gíneco-obstetricia tienen gran importancia desde un punto de vista clínico y fundamentalmente de salud pública, de ahí que se plantea la necesidad de lograr su rápida disminución mediante tratamientos eficaces1.
La cervicitis, una afección frecuente en ginecología y obstetricia, afecta al 50 % de las mujeres que han parido, muchas veces son el punto de partida de la infección hacia localizaciones más altas. En ésta existe una infección activa, generalmente extendida a la vagina, cuerpo uterino, que puede ser causada por diferentes agentes infecciosos, como, Neisseria gonorrhoeae, Gardnerella vaginalis, Chlamydia trachomatis, Trichomonas vaginalis, entre otros1.
]]> En el tratamiento de la cervicitis aguda y crónica (CAC) se utilizan diferentes antimicrobianos tanto sistémicos como locales, que en ocasiones no logran la total curación de esta infección. Algunos son costosos y requieren de grandes inversiones para su uso.Numerosas comunidades nativas utilizan fitomedicamentos como parte de la medicina convencional, basados en diferentes especies vegetales para aliviar sus enfermedades y síndromes, desde los más leves hasta los más graves2. P. elongatum (Matico), ampliamente utilizado en el tratamiento de afecciones ginecobstetricias por sus propiedades antibacteriana, antiinflamatoria y antioxidante3.
Las plantas silvestres presentan una infinidad de compuestos químicos desconocidos que podrían poseer gran valor terapéutico y medicinal, que se extraen con diversos solventes, como es el etanol, el matico ha motivado diversas investigaciones para determinar su actividad antifúngica4 evaluación genotóxica5, efecto biocida6, cicatrizante, entre otros. Trabajo realizados reportan un completo estudio fitoquímico de especies del género Piper, para comprobar su actividad leishmanicida., antiplasmódica y tripanocida7.
Las actividades biológicas más importantes determinadas para el matico son la antimicrobiana y la antiparasitaria. Los compuestos responsables de la actividad antibacteriana y antifúngica son de naturaleza química variada (derivados de ácido benzoico, fenilpropanoides, cromenos, flavonoides y chalconas)8. Por este motivo, el objetivo de este trabajo fue determinar la actividad biocida del extracto crudo etanólico del Piper elongatum (Matico) de cervicitis en mujeres en edad fértil.
Materiales y métodos
La investigación se realizó de julio a diciembre 2017 en el Centro de Salud Los Licenciados, ubicado en el distrito Ayacucho, provincia de Huamanga, departamento de Ayacucho, entre las coordenadas geográficas 74°12’24.49” longitud oeste, 13°09’53.08” latitud sur, a una altitud de 2739 msnm, con una temperatura máxima promedio de 18 ºC. La unidad experimental estuvo constituida por mujeres con diagnóstico de CAC, en una población de 250 mujeres en edad fértil, 50 mujeres que resultaron con diagnóstico de cervicitis aguda (CA) (34) y crónica (CC) (16), con edad promedio de 38 años. El criterio de inclusión fue el diagnóstico de CA y CC, asimismo se tuvo el consentimiento informado, constituyendo una muestra por conveniencia, para la conformación de los grupos caso-control. Tanto el grupo control como el caso fueron conformados por 25 mujeres.
Se colectaron hojas de matico en el mercado central de Ayacucho y certificadas por el Herbarium huamangesis de la Universidad Nacional de San Cristóbal de Huamanga (UNSCH), preparando los extractos en el laboratorio de Farmacia y Bioquímica de la misma Universidad. El extracto crudo etanólico (ECE) se obtuvo de 100 g. de hojas desecadas de P. elongatum, maceradas en 500 mL de etanol al 80% por 7 días con agitación constante, luego se filtró y concentró en baño maría hasta lograr un extracto blando9-13. Para la preparación de gel al 1% se disolvió 2 g. de carboximetilcelulosa en 100 mL de agua destilada hasta la disolución total, luego se enfrió hasta 40 °C y se añadió 1 g del extracto seco de las hojas de P. elongatum, se mezcló utilizando una varilla de vidrio hasta obtener una suspensión homogénea, luego se agregó 0.03 g de metilparabeno y 0.01g de propilparabeno. Finalmente se trasvasó a envases de vidrio con tapa rosca limpios y secos de 20 g de capacidad, rotulándose con el nombre y la fecha de preparación. Para la obtención de gel al 5% se repitió el mismo procedimiento, con la diferencia de que se añadió 5 g. del extracto seco de las hojas de P. elongatum.
En el grupo control, conformado por 25 mujeres (20 con CA y 5 con CC), según el protocolo propuesto por Olluwatosin14, recibieron el tratamiento siguiente: si se diagnosticó tricomoniasis (Metronidazol 2 g por vía oral en dosis única o 250 mg por vía oral cada 8 h por 7 días), en el caso de mujeres que tuvieron candidiasis, el tratamiento fue Clotrimazol 500 mg en óvulos, aplicado por vía vaginal por dos noches, más Ketoconazol 200 mg en tabletas por vía oral, 2 veces al día por 6 días. En caso de mujeres que se identificó el gonococo, se les administró Ceftriaxona 250 mg en dosis única por vía intramuscular + Azitromicina1 g por vía oral en dosis única.
Para el grupo caso (14 con CA y 11 con CC), se hizo el tratamiento con el extracto de matico mediante curación directa. Para ello se utilizó el espéculo (estéril o descartable), y antes de aplicar el extracto se procedió a realizar la higiene del exocérvix, la lesión cervical y las paredes vaginales, con agua estéril, seguidamente, se aplicó el extracto de matico directamente a la lesión cervical haciendo uso de un hisopo de 6”.
]]> En caso de CA, el tratamiento fue al 1%, por un tiempo de 1 mes cada dos días, con un total de 10 a 11 aplicaciones de 2 mL cada aplicación. Mientras que, en el grupo de mujeres con CC, se utilizó el extracto de matico al 5% con la misma frecuencia y dosificación, pero por dos meses. Es decir, que en total recibieron entre 20 a 22 aplicaciones.Los datos se almacenaron en los programas Excel y SPSS 23. Para el procesamiento de la información y análisis de datos se elaboraron tablas de frecuencias y para determinar las diferencias entre caso y control se empleó la prueba de ji cuadrado12.
Resultados
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Discusión
Las infecciones en ginecología y obstetricia afectan a la mujer en diferentes etapas y condiciones de su vida, constituyendo problemas de salud pública, por su impacto en la morbilidad y mortalidad materna y perinatal. Este es el caso de las infecciones de transmisión sexual (ITS), cuyo impacto trasciende el ámbito nacional15, son transmisibles sexualmente y por vía no sexual, cuyo estudio, prevención y tratamiento son de gran importancia para la salud del individuo, la familia y la sociedad, estas infecciones afectan a personas en edades sexualmente activas, aunque más frecuentemente a los adultos jóvenes16.
Por su alta morbilidad y mortalidad ocasionan efectos adversos en la calidad de vida y una pesada carga económica y sanitaria por los altos costos médicos, imputables al pago de servicios y de tratamientos médicos y a la pérdida en la productividad por el tiempo que pasan estas personas enfermas sin poder desempeñar una actividad productiva16, especialmente en nuestro grupo de trabajo que mayormente son comerciantes en el mercado local, la cervicitis, una enfermedad caracterizada por la inflamación del cuello uterino y puede ser aguda o crónica siendo la más frecuente de las lesiones ginecológicas17.
El uso de las plantas medicinales, por las poblaciones nativas encarna una práctica cultural que valora el conocimiento tradicional para tratar problemas de salud, esto adquiere importancia si consideramos la permanente destrucción ambiental y los recursos económicos escasos, sumados a los deficientes servicios de salud18.
Estudios previos detallan que P. elongatum, posee efecto cicatrizante, el extracto contiene terpenos, alcaloides, flavonoides8,19, sin embargo, no se realizó un estudio que permita aislar e identificar proteínas o péptidos como potenciales compuestos bioactivos con efecto biocida, se empleó el ECE por sus propiedades antibacteriana, antiinflamatoria y antioxidante3, como medicina alternativa en el tratamiento de la cervicitis.
La tabla 1, detalla la población inicial de 250 mujeres en edad fértil atendidas en una campaña de Papanicolaou, 34 fueron diagnosticadas con CA y 16 con CC, las que conformaron los grupos caso-control. La tabla 2 presenta el tipo de agentes causales del flujo vaginal en mujeres en edad fértil. El 64% de mujeres tuvieron como diagnóstico de examen de secreción vaginal la presencia de hongos, seguido del 36% que presentaron bacterias, estos microorganismos generan secreción vaginal que fueron motivo de consulta de todas las mujeres en estudio los que generan procesos inflamatorios en el cuello uterino ocasionando cervicitis, con estos datos preliminares se determinó el tratamiento a seguir para el grupo control, más no así para el grupo caso. Las acciones de amplio espectro antimicrobiano de P. elongatum “matico”, pueden deberse a que el extracto contiene componentes con acciones antibacterianas contra bacterias Gram-positivas y Gram-negativas20, y acciones antimicóticas21, así como efecto antiinflamatorio22.
La figura 1 expresa los casos de CA, quienes recibieron tratamiento con ECE al 1% de matico: el 29.4% (10 mujeres) se aliviaron y un 11.8% (4 mujeres) mejoraron, mientras del grupo control el 38.2% (13 mujeres) mejoraron y el 20.6% (7 mujeres) se aliviaron.
De la figura 2, se desprende que, del grupo de casos de CC, quienes recibieron tratamiento con ECE al 5% de matico: el 50% (8 mujeres) se aliviaron y un 18.8% (3 mujeres) mejoraron, mientras en el grupo control sólo lograron mejorar en un 31.3% (5 casos), ninguna se alivió.
]]> El presente estudio alcanza resultados alentadores ya que 29.4% de las mujeres diagnosticadas con CA y que recibieron el tratamiento con ECE de matico al 1% se aliviaron frente al 20.6% del grupo control (X2: 4.37, p = 0.037), en tanto que las mujeres diagnosticadas con CC y que fueron tratadas con ECE al 5%, se aliviaron el 50% y ninguna en el grupo control, lo que indicaría que hay efectividad del ECE (X2: 7.27, p = 0.007).Estos resultados se explican debido a que el matico posee diversos principios activos como los flavonoides y taninos, que cumplen la acción antiinflamatoria y cicatrizante22, además de antibacteriano y antimicótico6. Por ello, desempeñan un papel esencial en la protección frente a los fenómenos de daño oxidativo, y tienen efectos terapéuticos en un elevado número de patologías.
El efecto descrito puede deberse a su composición en proteínas identificadas mediante RP-HPLC, pertenecientes a la superfamilia "STI" de tipo Kunitz (inhibidores de tripsina), los que son inhibidores de proteasas. Las proteínas de la familia Kunitz, se unen con alta afinidad a sitios activos de proteasas y poseen un plegamiento característico, que también está en factores de crecimiento (FGF) e interleuquinas (IL-1β)13. Las proteasas en situaciones de herida ocasionan la degradación de la matriz extracelular (ME) y de otras proteínas como factores de crecimiento, en consecuencia, se produce una prolongación de la fase inflamatoria, lo que impide que la herida avance hacia la fase proliferativa13. Por estas razones, las proteínas que presentes en el ECE podrían favorecer el proceso de cicatrización, al tener actividad inhibitoria sobre proteasas23.
En la actualidad, los estudios sobre la actividad biocida de los extractos naturales van adquiriendo notoriedad por sus potencialidades para la mejora de la salud, existen muchos trabajos realizados sobre todo con Schinus molle, una especie nativa del Perú en cuanto a su efecto antibacteriano, a mayor concentración del extracto existe mayor efecto antibacteriano24. Se afirma que el efecto antibacteriano de las plantas podría asignarse a que contienen en sus hojas alcaloides, taninos, flavonoides, terpenos, saponinas esferoidales y aceites esenciales25, otras investigaciones manifiestan que el efecto antimicrobiano puede estar vinculado con la capacidad que muestra para inhibir la síntesis de ácidos nucleicos y la interacción en la pared celular del microorganismo26 y que los taninos, compuestos fenólicos en que la acción antimicrobiana se da por la desnaturalización de proteínas, la inactivación de adhesinas microbianas, enzimas y la formación de complejos en la pared celular26. Asimismo, se atribuye a la formación de complejos con proteínas solubles y extracelulares y células de la pared bacteriana y los terpenos que pueden romper estructuras de resistencia en la bacteria fácilmente. Provocando destrucción a la membrana citoplasmática y consecuentemente la muerte bacteriana, probando de este modo su efecto biocida, aunque estos efectos dependerán de la especie vegetal empleada que por su composición química diferente tendría un papel selectivo frente a hongos y bacterias26,27, quizás por este motivo se encuentran diferencias en los efectos.
Otro sustento lo señala en sus propiedades antiinflamatoria, hemostática, antiséptica27 y anti-infecciosa, descongestiva, contra la leucorrea y antiparasitaria28. Esta especie posee en sus hojas un grupo de compuestos químicos llamados los crómenos, que han evidenciado efectos tóxicos en células y bacterias29. Otros metabolitos secundarios presentes son los derivados del ácido benzoico prenilados que poseen actividad anti-bacteriana, citotóxica5,13.
El estudio realizado nos conduce a señalar que los componentes bioactivos presentes en el extracto crudo etanólico tienen efecto biocida sobre la CA y CC que afecta al 43.5% de mujeres en Ayacucho30, lo que brinda suficiente certeza para continuar estudios farmacológicos avanzados de sus potencialidades frente a este padecimiento, por estos motivos, se recomienda ahondar en el estudio de la actividad farmacológica y la toxicidad del extracto crudo etanólico de P. elongatum y de sus componentes principales, así como determinar los mecanismos de acción de sus metabolitos. Los resultados obtenidos, señalan la importancia que tiene la búsqueda de nuevas alternativas terapéuticas en la medicina tradicional y natural, que respondan a una serie de problemáticas que no atañe y son motivo de investigación multidisciplinaria.
Conflictos de intereses
Los autores expresan que no existen conflictos de intereses.
]]> Agradecimientos
Nuestro agradecimiento a la Directora del Centro de Salud Licenciados, por permitir la realización del presente trabajo de investigación y a la Universidad Nacional de San Cristóbal de Huamanga.
Aspectos éticos
Todos los aspectos procedimentales y experimentales fueron aprobados por la coordinación del Investigación e Innovación de la Facultad de Ciencias de la Salud de la Escuela Profesional de Obstetricia.
Protección de personas y animales. Los autores declaran que para en esta investigación no realizaron experimentos en seres humanos ni en animales.
Confidencialidad de los datos. Los autores declaran que han seguido los protocolos de su centro de trabajo sobre la publicación de datos de pacientes.
Derecho a la privacidad y consentimiento informado. Los autores declaran que en este artículo no aparecen datos de pacientes.
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