Evaluación del protocolo corto y largo de sincronización de celo en borregas inseminadas con semen congelado

Manrique Quispe, Yan Pierr; Pérez Guerra, Uri Harold; Málaga Apaza, Julio; Ayma Flores, Wilbur Rubén; Cardenas Minaya, Oscar Efrain; Pérez Durand, Manuel Guido; Manrique Quispe, Yan Pierr; Pérez Guerra, Uri Harold; Málaga Apaza, Julio; Ayma Flores, Wilbur Rubén; Cardenas Minaya, Oscar Efrain; Pérez Durand, Manuel Guido

doi:10.36610/j.jsaas.2021.080200073

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J.Selva Andina Anim. Sci. vol.8 no.2 La Paz 2021

https://doi.org/10.36610/j.jsaas.2021.080200073

Comunicación Corta

Evaluación del protocolo corto y largo de sincronización de celo en borregas inseminadas con semen congelado

Yan Pierr Manrique Quispe¹^*
http://orcid.org/0000-0001-8448-3174

Uri Harold Pérez Guerra¹
http://orcid.org/0000-0001-8321-8651

Julio Málaga Apaza²
http://orcid.org/0000-0003-4942-0041

Wilbur Rubén Ayma Flores³
http://orcid.org/0000-0001-8162-9414

Oscar Efrain Cardenas Minaya⁴
http://orcid.org/0000-0003-2138-9863

Manuel Guido Pérez Durand¹
http://orcid.org/0000-0001-6544-2924

^¹Universidad Nacional del Altiplano Puno. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia.. Laboratorio de Reproducción Animal. Av. Panamá No 710, Puno, Perú. Tel: +051-599430.

^² Universidad Nacional del Altiplano Puno. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Dirección de Post Grado. Av. Floral Nº 1153. Puno, Perú. Tel: +051-599430

^³ Universidad Nacional del Altiplano Puno. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Centro Experimental Carolina. Av. Floral Nº 1153. Puno, Perú. Tel: +051-599430

^⁴Instituto Nacional de Innovación Agraria. Laboratorio de Biotecnología Reproductiva La rinconada - Salcedo s/n. Puno, Perú. Tel: +051-363812

Resumen

El objetivo del trabajo fue evaluar el efecto de los protocolos corto (5 días) y largo (9 días) de SC en borregas inseminadas con semen congelado sobre el diámetro del cuerno uterino y tasa de preñez. El experimento se realizó en el Centro Experimental Carolina, perteneciente a la Universidad Nacional del Altiplano, y se utilizó 40 ovejas entre Corriedale y Criollas, en grupos de 20 para cada tratamiento, que fueron sincronizadas con esponjas intravaginales a base de Acetato de Medroxiprogesterona, durante 9 días (protocolo largo) y 5 días (protocolo corto) y al momento del retiro de la esponja se aplicó 350 UI de eCG. Para medir el diámetro del cuerno uterino se realizó la ecografía a las 36 h post retiro de la esponja y a las 56 h la inseminación cervical con semen descongelado y una posterior ecografía a los 35 días para confirmar la gestación. Los datos cuantitativos fueron analizados mediante la prueba estadística de “t” para diámetro de cuerno uterino y Ji cuadro para tasa de gestación. Los resultados para el diámetro de cuerno uterino fueron de 11.11±1.52 y 12.12±2.12 mm para el protocolo de sincronización corto y largo, respectivamente. Respecto a la tasa de preñez se obtuvo 21.05 % y 25 %, para el protocolo de sincronización corto y largo, respectivamente. Por lo que podemos concluir que el tratamiento largo de progesterona, tuvo mejores resultados al tratamiento corto tanto en el diámetro de cuerno uterino y tasa de gestación, pero no fue significativo esta diferencia (p>0.05).

Palabras clave: Estro; diámetro uterino; fertilidad; ovino; preñez; semen descongelado

Abstract

The objective of the study was to evaluate the effect of short (5 days) and long (9 days) SC protocols in ewes inseminated with frozen semen on the diameter of the uterine horn and pregnancy rate. The experiment was carried out at the Carolina Experimental Center, belonging to the National University of the Altiplano, and 40 ewes between Corriedale and Criollas were used; in groups of 20 for each treatment, which were synchronized with intravaginal sponges based on Medroxyprogesterone acetate, for 9 days (long protocol) and 5 days (short protocol) and at the time of sponge removal, 350 IU of eCG were applied. To measure the diameter of the uterine horn, ultrasonography was performed at 36 h post sponge removal and at 56 h after cervical insemination with thawed semen and a subsequent ultrasonography at 35 days to confirm gestation. Quantitative data were analyzed using the statistical t-test for uterine horn diameter and Chi-square for gestation rate. The results for uterine horn diameter were 11.11±1.52 and 12.12±2.12 mm for the short and long synchronization protocol, respectively. Regarding the pregnancy rate, 21.05 % and 25 % were obtained for the short and long synchronization protocol, respectively. Therefore, we can conclude that the long progesterone treatment had better results than the short treatment both in uterine diameter and pregnancy rate, but this difference was not significant (p>0.05).

Keywords: Estrus; fertility; ovine; pregnancy; thawed semen; uterine diameter.

Introducción

Un potencial que tiene Perú, es el sector ovino, cuenta con un gran número de animales, lamentablemente se tiene una tasa negativa de crecimiento (-3.5 %) y por ende una disminución en su producción (-1.17 %)¹ por lo tanto es necesario establecer mejoras en los índices productivos y reproductivos a través de programas de mejoramiento ganadero para el incremento de la producción de hatos, de ahí se viene promoviendo la difusión de semen de alto valor genético en la especie ovina, para ello la inseminación artificial (IA) es una biotecnología reproductiva apropiada para cumplir con esta meta².

Los métodos de sincronización de celo (SC) son una herramienta de mucha utilidad en los programas de IA², se han desarrollado varias técnicas de SC para inducir estro en ovinos³. Los tratamientos con progestágenos a largo plazo (12 a 14 días) se aplican comúnmente en ovinos⁴^-¹³, con un porcentaje de animales que presentan celo y tasas de fertilidad aceptables¹², pero con una fertilidad menor al celo natural¹⁴^-¹⁶. Esta tasa baja de fertilidad se da por diferentes causas como, deficiencias en la detección y SC, recambio folicular lento que genera un folículo persistente ⁴^,¹⁷^,¹⁸ por otro lado el sistema tradicional de sincronización trae consigo infecciones vaginales¹⁵^,¹⁹, con proliferación bacteriana²⁰ también se ha asociado con acumulo de moco vaginal ofensivo, mal olor²¹, adherencias vaginales, vaginitis²², que se traducen en bajas tasas de fertilidad, tras la IA con semen fresco.

Se ha informado que los protocolos cortos (5 a 7 días) con dispositivos progestágenos⁴^,²³, son tan efectivas como los protocolos tradicionales (12-14 días)²⁴.

Martinez-Ros et al.⁵, Amer & Hazzaa⁶, Ungerfeld & Rubianes⁷, Knights et al.³, mencionan que el tratamiento corto de sincronización tiene una fertilidad similar al tradicional de SC, mientras que Almadaly et al.²⁵, Viñoles et al.⁴, Farfán et al.⁹ Özyurtlu et al.¹⁴ Vilariño et al.¹³ Sareminejad et al.²⁶ reportan resultados de fertilidad mayores al tratamiento tradicional de sincronización, es por ello que protocolos de sincronización corta (5 a 7 días) podrían ser una alternativa al uso tradicional de sincronización largo, esto ayudaría a ser más flexible en campo y así evitar los problemas descritos anteriormente.

Frente a esta disyuntiva se pretende evaluar el protocolo corto y largo de SC en borregas inseminadas con semen congelado para determinar que protocolo es más eficiente en el diámetro uterino y la tasa de preñez.

Materiales y métodos

Lugar y animales del experimento. El experimento se realizó en el Centro de Experimental “Carolina”, perteneciente a la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la Universidad Nacional del Altiplano, ubicado en el Distrito de Puno y Provincia de Puno-Perú, alrededor de las coordenadas 15º 52` 11`` de Latitud Sur y 70º 24` 32`` de Longitud Oeste, a una altitud de 3995 m.s.n.m. Se utilizó un total de 40 ovinos (20 ovejas adultas Corriedale y 20 ovejas adultas Criollas) (Tabla 1), multíparas tomadas al azar del rebaño de borregas, con una condición corporal de 2.5 (escala de 1 a 5) que fueron ecografiadas para descartar preñez, clínicamente sanas, con un sistema de crianza extensivo, mantenidas antes y durante el experimento en condiciones de pastoreo en praderas naturales sin suplementación. El experimento se realizó entre los meses de abril y mayo.

Tabla 1 Distribución de ovinos según tratamiento

Ovinos Corriedale			Ovinos Criollos
20			20
*TL P4	**TC P4	*TL P4	**TC P4
10	10	10	10

*TL P4: Tratamiento Largo con progesterona.

** TC P4: Tratamiento Corto con progesterona

Sincronización de celo . A las borregas se les colocó esponjas intravaginales impregnadas con 60 mg. de acetato de medroxiprogesterona (MAP, Progespon^®, Syntex S.A., Argentina)²⁷ un día aleatorio del ciclo estral (Día 0), por un total de 5 días para el protocolo corto de progesterona⁵^,²⁸ y de 9 días para el protocolo largo de progesterona¹⁷^,²⁹. El día 5 y 9 de los tratamientos, se retiró las esponjas de P4 y se aplicó 350 UI de gonadotropina coriónica equina (eCG, Novormon^®, Syntex S.A., Argentina) vía intramuscular a cada borrega⁷^,¹⁵.

Evaluación ultrasonográfica e inseminación artificial. Los exámenes ultrasonográficos para la medición del diámetro del cuerno uterino (DCU) se realizó a las 36 h de post aplicación de eCG y el diagnóstico de gestación a los 35 días post IA, en ambos casos se usó un ecógrafo en modo B en tiempo real (Esoate Pie Medical^®, Tringa Linear VET). Las borregas fueron inseminadas a las 56 h post aplicación de eCG, se utilizó semen congelado en pajillas de 0.25 mL, que tenían una concentración espermática de 300 x 10⁶ previa descongelación a 35 °C por 30 s. Se hizo una evaluación subjetiva de la motilidad seminal que resultó ser el 45 % en promedio⁸, debido a que pertenecían a un mismo reproductor.

Análisis estadístico. Los datos fueron sometidos a estadística descriptiva (media, desviación estándar y coeficiente de variabilidad), al comparar dos grupos (tratamiento corto y largo) y evaluando su normalidad y homocedasticidad los DCU fueron sometidos a una Prueba de “t”, mientras que la tasa de preñez obtenida en proporciones fue sometida a la prueba no paramétrica de chi cuadrado ambas pruebas evaluadas con una confiabilidad del 95 %, todos los datos fueron evaluados en el programa estadístico R 3.4.1. con su extensión de RCmdr (R Core Team, 2020)

Resultados

En la Tabla 2 se describe los estadísticos para el DCU en borregas Corriedale y Criollas sincronizadas con el protocolo de sincronización corto y largo, observando medias similares tanto en relación al tipo de protocolo y raza (p=0.1206 y 0.6197 respectivamente) lo que indica que el periodo de sincronización no influye en la variación del DCU ni tampoco la raza de borregas. Se tuvo un total de 5 esponjas perdidas (4 para el protocolo largo y 1 para el protocolo corto).

Tabla 2 Diámetro de cuerno uterino en borregas

Factores	Niveles	No	Prom±D.S (mm)	CV (%)	Sign.
Periodo de sincronización	Corto	19	11.11±1.52	13.68	0.1206
Periodo de sincronización	Largo	16	12.12±2.12	17.49	0.1206
Raza de borregas	Corriedale	19	11.11±1.63	14.36	0.6197
Raza de borregas	Criollo	16	11.87±2.17	19.08	0.6197

La Tabla 3 muestra la tasa de preñez en borregas según periodo de sincronización y raza, la proporción de borregas preñadas sincronizadas por 5 días fue de 21.05 % y en borregas sincronizadas por 9 días fue de 25 % (p=0.7817), en tal sentido no habría dependencia alguna entre el periodo de duración del protocolo de sincronización de celo (corto y largo) en relación a la mayor o menor tasa de preñez.

Tabla 3 Proporción de preñez en borregas

Factores	Niveles	No	No de fértiles	% de fértiles
Periodo de sincronización	Corto	19	4	21.05
Periodo de sincronización	Largo	16	4	25

(P > 0.7817)

Discusión

Los resultados señalan la presencia de DCU significativo en ambos tratamientos, puede deberse a la aplicación de eCG que reduce la atresia de folículos preovulatorios, por lo que se genera un incremento de la concentración de estrógenos manifestando estro y ovulación en las borregas⁶^,³⁰^-³² puesto que aplicamos una dosis de 350 UI que influenció en la concentración de estrógenos. Sin embargo, se observa una ligera diferencia entre el DCU siendo ligeramente superior el tratamiento largo en relación al corto, esta característica pudo ser medida debido a que la pared uterina tiene una ecotextura más heterogénea (por el aumento de vascularización y el edema de los cuernos) que en el diestro y durante el celo, normalmente es posible diferenciar los pliegues endometriales y el miometrio, así como las pequeñas acumulaciones de líquido en la luz del útero³³, esta diferencia es debida a que durante el tratamiento largo se podría observar un mayor crecimiento folicular⁴, que se caracteriza por una mayor producción de estrógenos que conlleva a un ligero aumento del diámetro uterino debido al incremento del desarrollo endometrial y de glándulas endometriales, además de edema por mayor vascularización en comparación al tratamiento corto³^,⁶^,⁹. Además Teixeira de Sousa et al.³⁴ señalaron en novillas hay un incremento del DCU por efecto del estrógeno favoreciendo la preñes.

La comparación de DCU en relación a la raza no hay diferencia estadística siendo para ovinos Criollos (11.87±2.17 mm) en comparación a ovinos Corriedale (11.35±1.63 mm) lo que indicaría que las ovejas Criollas y Corriedale tuvieron respuestas parecidas a los protocolos de sincronización del presente estudio por lo que los estrógenos influenciaron en el diámetro uterino a pesar que existan factores genéticos o raciales³⁰ que podrían influenciar puesto que la raza Criolla es más prolífica que la Corriedale, lo que probablemente causó mayor sensibilidad al protocolo de sincronización y por ende un mayor DCU. Los estudios de DCU por efecto del protocolo de sincronización son escasos, por lo que este estudio podría poner la base para posteriores estudios respecto al tema, además ayudaría a identificar parámetros indicativos que sean útiles para el descarte de ovinos o como un indicador de presencia de estrógeno.

Respecto a la tasa de gestación (Tabla 3) son semejante con lo mencionado por Gibbons & Cueto¹⁰ y Muñoz et al.¹¹ para IA con semen congelado vía cervical con una sola inseminación mientras que Perez et al.⁸ tuvo una gestación de 68 % por su doble inseminación con semen descongelado¹¹ Igualmente coinciden con Knights et al.³, Ungerfeld & Rubianes⁷ y Martinez-Ros et al.⁵, al reportar tasas de gestación ligeramente mayores para protocolos largos (12 días) respecto a cortos (5 días), mientras que Koyuncu et al.²⁴, Da Silva et al.¹² y Amer & Hazzaa⁶ tuvieron tasas de gestación mucho mayores para el protocolo largo (14 o 12 días) respecto al corto ( 6 o 7 días), pero no concuerdan con Vilariño et al.¹³, Farfán et al.⁹ de Özyurtlu et al.¹⁴, Sareminejad et al.²⁶ ni con Verdoljak et al.²³ quienes reportaron una tasa de preñez mayor para protocolo corto (6 o 7 días) respecto al protocolo largo (14 o 12 días). Nuestros resultados de gestación para el tratamiento corto de 21.05 % y para el tratamiento largo de 25 % fueron bajos en comparación con los demás autores debido a varios factores como al uso de monta natural³^,⁵^-⁷^,¹²^,²⁴, alimentación balanceada⁶^,¹², aplicación de cloprostenol¹², aplicación eCG a dosis más altas³^,⁵^,⁷^,¹², efecto macho¹² diferencia entre razas, mientras que en nuestro trabajo se usó semen descongelado y se sabe que la congelación de semen disminuyendo la tasa de gestación³⁵^,³⁶ a esto se adiciona la carencia nutricional propia de la época de año⁶. La diferencia en nuestros resultados por efecto del tipo de protocolo podría deberse a que se aplicó eCG (350 UI) al final de los dos tratamientos por lo que pudo ocasionar formación de quistes foliculares en el tratamiento corto⁴, mientras que en el protocolo largo podría haber contrarrestado los problemas de fertilidad⁴^,¹⁷^,³⁷^,³⁸.

Además el protocolo largo tuvo esta mejoría posiblemente por la falta de uso de la prostaglandina en el protocolo corto¹⁹^,³⁹ para eliminar el cuerpo lúteo funcional ya que podría afectar su efectividad⁴ en época productiva, por último se debe considerar que nuestro tratamiento largo solo estuvo 9 días por lo que no excedió la vida media del cuerpo lúteo (11 a 12 días)¹⁷ favoreciendo el recambio folicular lo que podría generar ovocitos en buenas condiciones⁴⁰^,⁴¹. Por lo que podemos concluir que el protocolo de sincronización largo tuvo mejor DCU y tasa de gestación respecto al protocolo de sincronización corto, pero no significativo. A pesar de ello, desde el punto de vista económico y de manejo es posible reemplazar el régimen tradicional de P4 de (12-14 días) por un protocolo de sincronización corto (5-7 días).

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ID del artículo:092/JSAAS/2021

Fuente de financiamiento El presente artículo no cuenta con algún financiamiento, más que de recursos propios del grupo de investigación.

Conflictos de intereses Los autores declaramos que la presente investigación fue realizada en la Universidad Nacional del Altiplano Puno y no existe conflictos de intereses alguno entre los autores de este artículo

Agradecimientos Al Personal técnico y administrativo del Centro Experimental Carolina de la Universidad Nacional del Altiplano por el apoyo en la realización de la investigación.

Consideraciones éticas El estudio contó con la aprobación del Comité de Ética de la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la Universidad Nacional del Altiplano y se siguió las pautas establecidas por este Comité.

Aporte de los autores en el artículoManrique Quispe Yan Pierr, realizó la redacción del manuscrito y parte experimental de la investigación. Perez Guerra Uri Harold realizó, el diseño experimental y redacción del manuscrito. Malaga Apaza Julio, realizó revisión y redacción del manuscrito. Ayma Flores Wilbur Ruben, realizó la parte experimental de la investigación y redaccion. Cardenas Oscar realizó, el diseño del experimento y análisis estadístico. Perez Durand Manuel Guido, realizó la redacción y revisión final del manuscrito.

Limitaciones en la investigación No hubo limitaciones en la investigación.

Nota del Editor: Journal of the Selva Andina Animal Science (JSAAS) se mantiene neutral con respecto a los reclamos jurisdiccionales publicados en mapas y afiliaciones institucionales.

Recibido: 01 de Abril de 2021; Revisado: 01 de Julio de 2021; Aprobado: 01 de Agosto de 2021

*Dirección de contacto: Universidad Nacional del Altiplano Puno. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Laboratorio de Reproducción Animal. Av. Panamá No 710, Puno, Perú. Tel: +051-599430. Yan Pierr Manrique Quispe E-mail address: yanpierrmvz@gmail.com

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