Español (pdf)
Articulo en XML
Referencias del artículo
Traducción automática
Enviar articulo por email
Citado por SciELO 
Similares en
SciELO 
uBio 
Permalink
Revista CON-CIENCIA
versión impresa ISSN 2310-0265
Rev.Cs.Farm. y Bioq v.8 n.1 La Paz abr. 2020
ARTÍCULOS ESTUDIANTILES
Trazabilidad metrológica de un estándar secundario a un estándar primario de ciclosporina para pruebas de biodisponibilidad
Metrological traceability of a secondary standard to a primary cyclosporine standard for biodability tests
Trigo Orsini Myriam Lina1
Condori Espinoza Alejandra Silvia *
1. Jefe de Laboratorio Control de Calidad de Medicamentos y Biodisponibilidad del Instituto de Servicios de Laboratorio de Diagnostico e Investigación en Salud - SELADIS, Universidad Mayor de San Andrés, Av. Saavedra 2224. La Paz, Bolivia. ORCID: https://orcid.org/0000-0002-0874-4093
* Auxiliar de Investigación, Facultad de Ciencias Farmacéuticas y Bioquímicas, Universidad Mayor de San Andrés, Av. Saavedra 2224. La Paz, Bolivia* mylitrigo@gmail.com ORCID:https://orcid.org/0000-0002-2251-0218
Fecha de Recepción: 15 Julio 2020 Fecha de Aceptación: 10 Agosto de 2020
Resumen
Introducción: El proceso de trazabilidad metrológica de un estándar secundario a uno primario es una propiedad del resultado de una medición o del valor de un estándar, por la cual se puede relacionar a referencias establecidas, usualmente nacionales o internacionales, a través de una cadena ininterrumpida de comparaciones, todas las cuales tienen incertidumbres determinadas.
Objetivo: Realizar la trazabilidad de un estándar secundario a uno primario de ciclosporina y de esta manera asegurar la calidad y pureza del mismo.
Métodos: Se utilizaron los siguientes métodos: descripción organoléptica, solubilidad, identificación y cuantificación por Cromatografía Líquida de Alta Resolución (HPLC) en fase reversa.
Resultados: El estándar secundario de ciclosporina, cumplió con todas las especificaciones referidas a descripción organoléptica, solubilidad, identificación y se obtuvo una pureza de 97,5% utilizando un estándar primario cuyo título es de 98,5 %.
Conclusión: Se realizó la trazabilidad metrológica de un estándar secundario a un estándar primario para poder utilizarlo como estándar de trabajo, garantizando el título del mismo. Esta propiedad es uno de los pilares para que los resultados de medida sean comparables entre sí, independientemente del lugar y tiempo en el que se hayan realizado, facilitando su aceptación universal y reduciendo las potenciales barreras técnicas al comercio.
Palabras Claves
Trazabilidad, ciclosporina, estándar primario, estándar secundario, biodisponibilidad.
Abstract
Introduction: The metrological traceability process from a secondary standard to a primary one is a property of the result of a measurement or the value of a standard, by which it can be related to established references, usually national or international, through an uninterrupted chain of comparisons, all of which have certain uncertainties.
Objective: To carry out the traceability of a secondary standard to a primary one of cyclosporine and in this way to ensure its quality and purity.
Methods: The following methods were used: organoleptic description, solubility, identification and quantification by reversed phase High Performance Liquid Chromatography (HPLC).
Results: The secondary cyclosporine standard met all the specifications referred to organoleptic description, solubility, identification and a purity of 97.5% was obtained using a primary standard whose titer is 98.5%.
Conclusion: The metrological traceability of a secondary standard to a primary standard was carried out in order to be able to use it as a working standard, guaranteeing its title. This property is one of the pillars for the measurement results to be comparable with each other, regardless of the place and time in which they have been carried out, facilitating their universal acceptance and reducing potential technicalbarriers to trade.
Keywords
Traceability, cyclosporine, primary standard, secondary standard, bioavailability.
INTRODUCCIÓN
El proceso de trazabilidad metrológica de un estándar secundario a uno primario es una propiedad del resultado de una medición o del valor de un estándar, por la cual se puede relacionar a referencias establecidas, usualmente nacionales o internacionales, a través de una cadena ininterrumpida de comparaciones, todas las cuales tienen incertidumbres determinadas; de esta manera se buscará un procedimiento adecuado para el análisis, obteniendo un estándar secundario trazado asegurando la calidad y pureza del mismo, para así poder utilizarlo como estándar de trabajo.
Sustancia química de referencia primaria
Una sustancia química de referencia primaria designada es aquella en la que se reconoce de forma generalizada que está dotada de las cualidades apropiadas en un contexto especificado y cuyo valor se acepta sin necesidad de comparación con otra sustancia química.
Sustancia química de referencia secundaria
Una sustancia química de referencia secundaria es aquella sustancia cuyas características se asignan o calibran por comparación con una sustancia química de referencia primaria. El alcance de la caracterización y las pruebas de una sustancia química de referencia secundaria puede ser menor que para una sustancia química de referencia primaria. Esta definición puede aplicarse, entre otras cosas, a algunas sustancias denominadas "patrones de trabajo".
Importancia de la trazabilidad
Permite la comparación entre los resultados a través del tiempo y el lugar:
Entre laboratorios de mediciones
Pasos importantes para obtener trazabilidad
1. Definir el mesurando (cantidad que se desea medir analito + matriz) y establecer unidades de medición
2. Identificación de equipos, materiales y reactivos que se usarán para las mediciones con sus correspondientes especificaciones.
3. Identificar las condiciones experimentales dadas en el método (temperatura, tiempo, etc.) y su influencia en el resultado.
4. Obtener materiales de referencia apropiados.
Ciclosporina
Es un fármaco inmunosupresor ampliamente usado en el trasplante de órganos, con el fin de reducir la actividad del sistema inmunitario.
Estructura química
Fig. 1. Estructura química de la ciclosporina
Mecanismo de acción
La ciclosporina disminuye la respuesta inmunitaria celular, inhibiendo la producción de anticuerpos T-dependientes. También inhibe la producción y liberación de linfocinas, incluyendo interleucina 2.
Dosificación
Trasplante de órganos: Oral, inicio: 10-25 mg/Kg/día en 2 dosis, durante 12 horas antes del trasplante y mantener 1 a 2 semanas: mantenimiento 2-6 mg/Kg/día en 2 dosis en administración con otros inmunosupresores: 3-6 mg/Kg/día en 2 dosis
Perfusión IV (2 - 6h) 1/3 dosis mg/Kg/día oral.
Contraindicaciones
Hipersensibilidad a la ciclosporina. Enfermedades autoinmunes con alteración de la función renal (excepto proteinuria en pacientes con síndrome nefrótico), hipertensión arterial (HTA) no controlada.
Pacientes con psoriasis que están recibiendo otros inmunosupresores y radioterapia.
Interacciones.
Antibióticos macrólidos, ketoconazol, fluconazol, verapamilo, metoclo-pramida, metilprednisolona, alopurinol, amiodarona, inhibidores de la proteasa, colchicina, barbitúricos, carbamazepina, fenitoína, aminoglucósidos, naproxeno, diclofenaco, metotrexato.
Biodisponibilidad aumentada por ingesta concomitante de zumo de pomelo.
Reacciones adversas.
Disfunción renal, hipertensión arterial (HTA), temblor, cefaleas incluyendo migraña, anorexia, náuseas y vómitos, dolor abdominal, diarrea, hiperplasia gingival, disfunción hepática, calambres musculares, mialgia, fatiga.
MATERIALES Y MÉTODOS
Acetonitrilo calidad HPLC, Ácido fosfórico para análisis, Agua grado HPLC
Los equipos utilizados fueron: Balanza analítica, con una sensibilidad de 0,1 mg; Cromatógrafo Líquido de Alta Resolución
Material de laboratorio: matraces volumétricos, pipetas volumétricas, vasos de precipitados y otros
Procedimientos de Trabajo
Pruebas para trazabilidad metrológica de ciclosporina de un estándar secundario a un estándar primario:
Características organolépticas
Solubilidad
Pérdida por secado
Identificación
Cuantificación
1. CARACTERÍSTICAS ORGANOLEPTICAS
Definir las características organolépticas: Color, olor, aspecto y forma de partícula.
2. SOLUBILIDAD
Definir la solubilidad de la ciclosporina estándar secundario en: metanol, etanol, acetona, cloroformo y agua.
3. IDENTIFICACION Y CUANTIFICACION POR HPLC
IDENTIFICACION
El pico principal en el cromatograma obtenido con la solución de ensayo es similar en el tiempo de retención al pico principal del cromatograma obtenido en la solución de referencia
CUANTIFICACION
APTITUD DEL SISTEMA
Inyectar entre 6 a 10 veces la solución estándar de concentración de 625ng/ml, utilizando como solvente Acetonitrilo:Agua (50:50) y calcular:
Precisión, expresada como el coeficiente de variación obtenido a partir de 6 a 10 inyecciones repetidas de solución de estándar de trabajo, según USP 37.
o Parámetros cromatográficos
o Factor de capacidad
o Número de platos teóricos (N):
o Factor de asimetría o de cola (tailing)
Solución estándar: Preparar tres soluciones de concentración final 625ng/mL utilizando el estándar primario USP de Ciclosporina empleando Acetonitrilo:Agua (50:50) como solvente
Solución de trabajo: Preparar tres soluciones de concentración final 625ng/mL utilizando el estándar de trabajo (estándar secundario) de Ciclosporina empleando Acetonitrilo:Agua (50:50) como solvente
Las condiciones cromatográficas utilizadas fueron: Un Cromatógrafo Líquido de Alta Resolución, Agilent con bomba binaria y una separación en gradiente; con flujo de 1.4 mL/min una columna 4,6 mm x 25 cm; relleno L 7 de 5 um, marca Agilent; el detector de Arreglo de Diodos a 210 nm; temperatura de columna de 75°C y Fase móvil: acetonitrilo:agua (1:1) pH3
Cálculo para la pureza del estándar secundario
Calcular el porcentaje de ciclosporina (C62Hrn N11012) en la porción de Ciclosporina tomada:
Resultado = (ru/rs) x P x 100
ru = área del pico de ciclosporina de la Solución muestra
rs = área del pico de ciclosporina de la Solución estándar
P = pureza de ciclosporina en ER Ciclosporina
RESULTADOS
1. DESCRIPCION ORGANOLEPTICA
Tabla N°1: Características organolépticas de la muestra
Fuente: Elaboración propia
2. SOLUBILIDAD
Tabla N°2: Solubilidad de la muestra
Fuente: Elaboración propia
Nota. El requisito fue obtenido de Adaptado de "cyclosporins", THE MERCK INDEX FIFTEENTH EDITION
3. IDENTIFICACION POR HPLC:
Gráfico N°1: Cromatograma del estándar primario de ciclosporina 625ng/ml
Fuente: Datos primarios del HPLC
Gráfico N°2: Cromatograma de la muestra de ciclosporina 625ng/ml (estándar secundario)
Fuente: Datos primarios del HPLC
CUANTIFICACIÓN
APTITUD DEL SISTEMA CICLOSPORINA STD PRIMARIO 625(ng-ml)
CALCULO DE LA PUREZA DEL ESTANDAR SECUNDARIO
El estándar de trabajo tiene un título de 97,55%
CONCLUSIONES
De acuerdo a los resultados obtenidos se puede concluir que:
La trazabilidad de un estándar secundario a uno primario de ciclosporina puede realizarse mediante una cadena ininterrumpida de comparaciones: la descripción organoléptica, determinación de solubilidad e identificación y cuantificación por cromatografía líquida de alta resolución (HPLC).
Se realizó la trazabilidad metrológica de un estándar secundario a un estándar primario de tal manera que el estándar secundario de la ciclosporina puede ser utilizado como estándar de trabajo, debido a que se tiene el título del mismo. Esta propiedad es uno de los pilares para que los resultados de medida sean comparables entre sí, independientemente del lugar y tiempo en el que se hayan realizado, facilitando su aceptación universal y reduciendo las potenciales barreras técnicas al comercio.
El título obtenido para el estándar secundario fue de 97,55% de pureza.
RECOMENDACIONES
Es importante realizar la trazabilidad metrológica cuando se trabaja con estándares secundarios para saber con certeza el título del estándar de trabajo, debido a que la trazabilidad metrológica garantiza que los resultados de medida sean comparables entre sí, independientemente del lugar y tiempo en que se hayan realizado facilitando el que puedan ser universalmente aceptados.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFÍA
Aspapel. (2017).guía de directrices 2012.qxd (pdf). Disponible en: www.aspapel.es. Fecha de consulta: 12 de marzo de 2017. [ Links ]
METROLÓGICA, T. GUÍA TÉCNICA SOBRE TRAZABILIDAD METROLÓGICA E INCERTIDUMBRE DE MEDIDA PARA PRODUCTORES DE MATERIALES DE REFERENCIA. OMS. (2017). Anexo 3 informe 35 Directrices generales para el establecimiento, el mantenimiento y la distribución de sustancias químicas de referencia. Fecha de consulta: 11 de marzo de 2017 [ Links ]
Panteghini, M., Myers, G. L., Miller, W. G., & Greenberg, N. (2009). La importancia de la trazabilidad metrológica en la validez de la medición de creatinina como índice de función renal. Acta bioquímica clínica latinoamericana, 43(2), 271-277. [ Links ]
Pubchem. (2017). cyclosporin A. Disponible en: https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/com-pound/cyclosporin_a. Fecha de consulta: 29 septiembre de 2017. [ Links ]
Quintana-Ponce, S., Rea-Vázquez, M. G., & Barlandas-Rendón, N. R. E. (2017). Trazabilidad metrológica en los laboratorios clínicos y bancos de sangre acreditados en México. Revista Latinoamericana de Patología Clínica y Medicina de Laboratorio, 63(4), 214-218. [ Links ]
Riu, J., Boqué, R., Maroto, A., & Rius, F. X. (2000). Exactitud y trazabilidad. Técnicas de Laboratorio. En: Universidad & Empresa, 22(254), 1. [ Links ]
Rodríguez, A., Mercader, F., López, M. G., Herrera, R., Reyes, A., Antaño, R., & Álvarez, A. SOBRE LA METROLOGÍA Y TRAZABILIDAD METROLÓGICA EN LOS RESULTADOS DE MEDIDAS ELECTROQUÍMICAS. [ Links ]
S/a.(2017).Estándar mundial de trazabilidad (pdf). Disponible en: www.gs1.org.ar Fecha de consulta: 11 de marzo de 2017.
S/a.(2017).Trazabilidad (pdf). Disponible en: www.dominiopriting.com Fecha de consulta: 11 de marzo de 2017.
Samplón, M., & Artal, J. S. EXPOSICION DOCENTE DE LOS CONCEPTOS DE CALIBRACIÓN, TRAZABILIDAD METROLÓGICA E INTERCOMPARACIÓN. [ Links ]
THE MERCK INDEX. (2013).the Merck index an encyclopedia of chemicals, drug and biologicals. fifteenth edition.The royal society of chemistry. Cyclosporins. pp. 2751. [ Links ]
THE UNITED STATES PHARMACOPEIAL CONVENTION. (2014). Farmacopea de los Estados Unidos de América USP-37. Estados Unidos de América: United book press, inc. pp.2677-2678. [ Links ]
UNAN-león. (2017).Laboratorio de control de calidad de medicamentos (pdf). Disponible en: www.riul.unanleon.edu.ni. Fecha de consulta: 12 de marzo de 2017. [ Links ]
Universidad panamericana. (2017). guía para la elaboración y presentación de proyectos de investigación e informe final, (pdf). Disponible en: www.guiadeinvestigacion.es. Fecha de consulta: 12 de marzo de 2017. [ Links ]
Vademécum. (2017).Ciclosporina. Disponible en: www.vademecum.es. Fecha de consulta: 12 de marzo de 2017. [ Links ]
