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Journal of the Selva Andina Research Society
Print version ISSN 2072-9294On-line version ISSN 2072-9308
J. Selva Andina Res. Soc. vol.12 no.1 La Paz 2021
https://doi.org/10.36610/j.jsars.2021.12010021
Nota de Investigación
Actividad antibacteriana in vitro de extracto etanólico crudo de las hojas de Origanum vulgare,frente Staphylococcus aureus ATCC 29213, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 y Escherichia coli ATCC 25922
In vitro antibacterial activity of crude ethanolic extract from the leaves of Origanum vulgare, against Staphylococcus aureus ATCC 29213, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 and Escherichia coli ATCC 25922
Pérez-Delgado Orlando1*, Alvarado-Pineda Rosa Liliana2, Yacarini-Martínez Antero Enrique2
1Parque Científico Tecnológico. Universidad Señor de Sipán. Km 5 Carretera a Pimentel. Chiclayo, Perú. Tel: +51(074) 481610.
2Departamento de Ciencias de la Salud. Facultad de Medicina. Universidad Católica Santo Toribio de Mogrovejo. Av. San Josemaría Escrivá de Balaguer Nº 855. Chiclayo, Perú. Tel: +51(074) 606200.
*Dirección de contacto: Parque Científico Tecnológico. Universidad Señor de Sipán. Km 5 Carretera a Pimentel. Chiclayo, Perú. Tel: +51950630134
Orlando Pérez-Delgado
E-mail address: operezd@gmail.com
J. Selva Andina Res. Soc. 2021; 12(1):21-29.
ID del artículo: 143/JSARS/2020
Historial del artículo.
Recibido septiembre 2020.
Devuelto noviembre 2020.
Aceptado diciembre 2020.
Disponible en línea, febrero 2021.
Resumen
El presente trabajo cuyo objetivo fue evaluar la actividad antibacteriana in vitro del extracto etanólico de hojas de Origanum vulgare frente a Staphylococcus aureus ATCC 29213, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 y Escherichia coli ATCC 25922. El estudio fue experimental, se emplearon 72 unidades experimentales, constituidas por un tipo de extracto etanólico tres concentraciones, tres especies bacterianas y 8 repeticiones por grupo experimental. A través del método de dilución doble seriada se determinaron las diferentes concentraciones, para la actividad antibacteriana se empleó el método de difusión en pozo. Se emplearon concentraciones de 80, 40 y 20 mg/mL. El extracto etanólico presentó actividad antibacteriana in vitro, con un promedio del tamaño los halos de inhibición para S. aureus de 21.64, 15.24 y 11.45 mm, P. aeruginosa 13.31, 12.27 y 7.35 mm, E. coli de 12.5, 11.40 y 10.6 mm para las diferentes concentraciones. Se concluye que el extracto etanólico de O. vulgare tienen capacidad antibacteriana sobre S. aureus ATCC 29213, P. aeruginosa ATCC 27853 y E. coli ATCC 25922.
Palabras clave: Origanum vulgare, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, antibacteriano, extracto etanólico.
Abstract
The present work whose objective was to evaluate the in vitro antibacterial activity of the ethanolic extract of Origanum vulgare leaves against Staphylococcus aureus ATCC 29213, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 and Escherichia coli ATCC 25922. The study was experimental, 72 experimental units were used, consisting of a type of ethanolic extract three concentrations, three bacterial species and eight repetitions per experimental group. Through the serial double dilution method, the different concentrations were determined, for the antibacterial activity, the well diffusion method was used. Concentrations of 80 mg/mL, 40 mg/mL and 20 mg/mL were used. The ethanolic extract showed antibacterial activity in vitro, with an average size of the inhibition halos for S. aureus of 21.64, 15.24 and 11.45 mm, P. aeruginosa 13.31, 12.27 and 7.35 mm, E. coli 12.5, 11.40 and 10.6 mm for the different concentrations. It is concluded that the ethanolic extract of O. vulgare has antibacterial capacity on S. aureus ATCC 29213, P. aeruginosa ATCC 27853 and E. coli ATCC 25922.
Keywords: Origanum vulgare, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, antibacterial, ethanolic extract.
Introducción
La aparición de microorganismos resistentes (MR), ya sea por mutaciones o la adquisición de elementos genéticos móviles que portan genes de resistencia, puede tener lugar independientemente de la presencia de agentes antibacterianos siendo una amenaza para la salud mundial1.
En las últimas décadas, debido a la evolución de las bacterias y al abuso de antibióticos, la resistencia de Staphylococcus aureus ha aumentado gradualmente la tasa de infección por S. aureus multidrogo-resistente (MRSA) y el tratamiento clínico antiinfeccioso se ha vuelto más difícil2. Inclusive existen estudios que señalan que el 63% de los aislados de MRSA producen biopelículas y con respuesta de resistencia a dos antibióticos como la eritromicina y clindamicina siendo cepas con genes formadores de biopelículas3.
Los hallazgos han demostrado la existencia de microbios resistentes a los antibióticos que en gran parte están presentes en la Unidad de Cuidados Intensivos (UCI), siendo Pseudomonas aeruginosa responsable de una amplia gama de infecciones adquiridas en la UCI en pacientes críticamente enfermos4, siendo reportada la resistencia intrínseca o mutaciones cromosómica a través de adquisición de genes de resistencia frente a penicilinas, cefalosporinas, monobactams, carbapenémicos incluyendo a los aminoglucósidos y fluoroquinolonas5.
Por otro lado, se tiene a Escherichia coli uropatógena (UPEC) como responsable de infecciones del tracto urinario, que posee un arsenal de genes de virulencia, el más frecuente el gen fimH, seguido de los genes: aer, hly, pap, cnf, sfa y afa que contribuyen a su capacidad para superar diferentes mecanismos de defensa y causar enfermedades6, además de aislados de E. coli existe variación con respecto a la susceptibilidad de antibióticos como la cefotaxima, nitrofurantoína, cefuroxima, ceftazidima, ácido nalidíxico, ciprofloxacina e incluso la prevalencia de E. coli productora de β-lactamasas de espectro extendido (BLEE) se ha visto aumentado significativamente7,8.
Las propiedades antibacterianas y antioxidantes del orégano se han atribuido principalmente al carvacrol y al timol, componentes principales de su aceite esencial que provocan alteraciones estructurales y funcionales en la membrana celular 9-11, También en un estudio, los extractos de hojas de O. vulgare se ha probado su actividad bactericida contra diferentes patógenos importantes en la acuicultura de peces12-14, con hallazgos de actividad frente bacterias causantes de enfermedades periodontales15,16, inclusive es empleado en la estabilidad de almacenamiento de carnes para evitar su descomposición17,18.
La actividad antimicrobiana de los extractos de O. vulgare, tiene una predilección por bacterias gram positivas como S. aureus, pero varía frente a bacterias gram negativas como E. coli, Kebsiella pneumoniae, P. aeruginosa19-21 e inclusive dependiendo del solvente como etanol y metanol permite el aislamiento de compuestos bioactivos de mucho interés en su acción antioxidante, antibacteriana y antifúngica22-24, como también su hallazgo con actividad antiviral25.
Siendo posible el efecto antibacteriano del extracto etanólico, pueda presentar variaciones según sus concentraciones, se elaboró para la presente investigación cuyo objetivo fue, evaluar el efecto antibacteriano in vitro del extracto etanólico de las hojas de O. vulgare frente a S. aureus ATCC 29213, P. aeruginosa ATCC 27853 y E. coli ATCC 25922.
Materiales y métodos
Se realizó un estudio in vitro con diseño experimental de estímulo creciente26, con extracto etanólico (EE) de O. vulgare, 3 concentraciones de cada extracto y con 8 repeticiones, como control positivo (CP) se empleó etanol y control negativo (CN) agua destilada estéril.
Del material vegetal. Se colectaron ejemplares de O. vulgare con ramas, hojas y flores27, de cultivos aledaños en el distrito de Chiclayo, Región Lambayeque, Perú, de los cuales dos ejemplares fueron transportados al herbario de la Facultad de Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo para su identificación, luego se inició el proceso de desinfección de las hojas con alcohol de 95º GL. Posteriormente las hojas fueron secadas empleando una estufa a temperatura de 50 °C durante ocho horas. Después, 500 g de hojas pasaron a la etapa de molienda hasta obtener material en polvo.
Preparación del extracto etanólico de O. vulgare. Para la preparación del EE28, se maceraron 40 g de polvo O. vulgare y se agregaron 200 mL de etanol absoluto, en una botella de vidrio ámbar hermética, se agitó la botella diariamente durante una semana a temperatura ambiente, el producto fue filtrado con papel filtro Whatmann N° 40, se obtuvo un extracto libre de residuos, el filtrado se concentró en Sohxlet hasta sequedad, 2 g de residuo seco fue guardado en refrigeración a 2 °C en frasco de vidrio color ámbar. Para las concentraciones, 2 g de residuo seco se disolvió en 25 mL de etanol absoluto, obteniendo una solución madre de 80 mg/mL, se realizó diluciones dobles seriadas, obteniendo concentraciones de 40 mg/mL y 20 mg/mL.
Preparación del inóculo de S aureus ATCC 29213, P. aeruginosa ATCC 27853 y E. coli ATCC 25922. Fueron adquiridas de la colección de cultivo tipo Americano ATCC (American Type Culture Collection) Culti-Loops Thermo Scientific. Según las orientaciones de la Clinical and Laboratory Standars Institute29, de 3 a 5 colonias de fueron seleccionadas de un cultivo en placa de agar Mueller-Hinton después de 24 h. La parte superior de cada colonia se tocó con un asa y se transfirió a un tubo con 4-5 mL de caldo Müller-Hinton y con ayuda del densitómetro (DEN-1B) se midió turbidez con absorbancias de 0.08-0.1 para bacterias equivalente a 0.5 del estándar de McFarland30 obteniendo una suspensión bacteriana resultante de1 a 2 x 108 (UFC/mL). En un lapso de tiempo óptimo de 15 min después de ajustar la turbidez de la suspensión del inóculo, con una torunda de algodón se inoculó sobre toda la superficie de una placa de agar Mueller-Hinton.
Actividad antibacteriana de los extractos de O. vulgare. A través del método de difusión en pozo30, sobre las placas sembradas, se realizaron 4 perforaciones de 6 mm de diámetro, con un sacabocado y se colocaron 50 μL en cada pozo los extractos de orégano, como CP se empleó etanol y CN agua destilada estéril, posteriormente fueron selladas con parafilm, se incubó a 37 °C, por un período de 24 h, luego se procedió a medir el diámetro de inhibición.
Análisis estadístico. Para determinar la relación del efecto antibacteriano del EE de O. vulgare en el crecimiento bacteriano, se realizó un análisis de varianza (ANOVA) con un nivel de significación de 0.05 y una Prueba de Tukey para la comparación de los extractos con el control positivo.
Resultados
En la figura 1, se presenta los resultados de la actividad antibacteriana del EE de O. vulgare en las concentraciones de 80, 40 y 20 mg/mL, frente una especie bacteriana gran positiva S. aureus ATCC 29213, dos especies de bacterias gran negativas como P. aeruginosa ATCC 27853 y E. coli ATCC 25922, además se observa que las cepas gran negativas ofrecen menor susceptibilidad en comparación a S. aureus, además, siendo posible observar que el etanol activa los principios bioactivos presentes en el residuo seco de O. vulgare,siendo característica visible entre las concentraciones del extracto y el CP (etanol).
Figura 1 Actividad antibacteriana del extracto etanólico crudo de O. vulgare frente a (A) S. aureus ATCC 29213 (B) P. aeruginosa ATCC 27853 y (C) E. coli ATCC 25922 |
En la figura 2, se presenta el promedio de los tamaños de los halos inhibición del EE de O. vulgare en las concentraciones de 80, 40 y 20 mg/mL, se observa halos promedios de 21.64, 15.24 y 11.45 mm para S. aureus, para P. aeruginosa de 13.31, 12.27 y 7.35 mm, para E. coli 12.5, 11.4 y 10.6 mm, inclusive la actividad antibacteriana del etanol es menor en comparación al extracto.
Figura 2 Tamaño de los halos de inhibición (mm) de la actividad antibacteriana del extracto etanólico frente a S. aureus ATCC 29213 P. aeruginosa ATCC 27853 y E. coli ATCC 25922 |
Discusión
El presente trabajo de investigación tuvo como objetivo evaluar la actividad antibacteriana in vitro del EE de O. vulgare (Orégano).
Los resultados obtenidos en este estudio indican que el EE de O. vulgare posee propiedades antibacterianas inclusive, mayor actividad contra S. aureus ATCC 29213, en relación a E. coli ATCC 25922 y P. aeruginosa ATCC 27853, en las concentraciones de 80, 40 y 20 mg/mL, respectivamente. De acuerdo a estudios realizados, han evidenciado una abundancia de hidrocarburos monoterpénicos y compuestos fenólicos, siendo los principales componentes el carvacrol, seguido de timol, p-cimeno y 1-octacosanol, compuestos que tienen una importante actividad antimicrobiana amplia frente a bacterias, hongos y levaduras9,31.
Así mismo, se observaron la presencia de halos promedios de: 21.64, 15.24 y 11.45 mm para S. aureus ATCC 29213, para P. aeruginosa ATCC 27853 de 13.31, 12.27 y 7.35 mm, y para E. coli ATCC 25922 de 12.5, 11.4 y 10.6. En otros estudios se han verificado que los EE tuvieron efecto antibacteriano contra cepas clínicas aisladas con resistencia múltiple de S. aureus con halos de inhibición de 10.44 mm, le sigue E. coli con 9.88 mm y P. aeruginosa con 9.77mm a concentración de 400 mg/mL32, con nuestros resultados, en comparación con los hallazgos mencionados, se obtuvieron halos mayores, lo cual puede deberse a las cepas estándar ATCC utilizadas en el mencionado estudio, toda vez que se emplearon concentraciones de 80, 40 y 20 mg/mL para S. aureus, E. coli y P. aeruginosa. Siendo la cepa de S. aureus la que presentó mayor susceptibilidad con halo de inhibición de 21.64 mm a la máxima concentración del extracto, le siguen las cepas de P. aeruginosa y E. coli (figura 1) en nuestro estudio como en el mencionado.
Asimismo, en otra investigación realizada en Irak reportó que dicho extracto de O. vulgare a una concentración de 50 y 100 mg/mL presentaron actividad antibacteriana frente a S. aureus con zonas de inhibición de 27-32 mm, seguido de E. coli de 25-29 mm y para P. aeruginosa de 19-28 mm33, en comparación con nuestro estudio guarda coherencia y siendo O. vulgare una planta medicinal con potencial terapéutico y presencia de compuestos bioactivos capaces de inhibir el crecimiento de las bacterias.
Según Neira-Llerena34, con el EE de O. vulgare se muestra como el de mayor actividad antimicrobiana en esta investigación, tras haber alcanzado los porcentajes y halos de inhibición más altos frente a S. aureus (16.65 mm) a concentración de 30 mg/mL, en nuestro estudio el tamaño del halo de inhibición a concentración de 80 mg/mL, fue de 21.64 mm, pero si comparamos en nuestro estudio a la concentración de 40 mg/mL fue de 15.24 mm en relación al estudio anterior a concentración de 30 mg/mL que es de 16.65 mm, los resultados son muy similares, señalando que actividad antibacteriana de orégano frente a S. aureus es efectiva para este microorganismo34.
En cuanto a su actividad antimicrobiana, el resultado de la investigación ratifica que el EE del orégano, posee actividad antibacteriana frente a bacterias gram-positivas como S. aureus y sobre bacterias gram-negativas como E. coli, P. aeruginosa.
No obstante, otros estudios a través del método de microdilución reportaron variabilidad de la CMI del extracto etanólico de O. vulgare frente S. aureus de 500 µg/mL E. coli de 250 µg/mL y frente a P. aeruginosa no presento actividad35, asimismo también emplearon el aceite esencial de O. vulgare frente a otros microorganismos clínicos, teniendo variabilidad en su acción antibacteriana siendo las cepas de E. coli entre las más resistentes a la acción antibacteriana de 24.8 a 28.6 µg/mL36.
Los resultados de este trabajo permiten concluir que el extracto etanólico de O. vulgare, es capaz de producir compuestos con potencial antibacteriano frente a patógenos nosocomiales, lo que amerita continuar con la búsqueda de los componentes bioactivos responsables de esta actividad y así puedan emplearse como alternativa terapéutica para el tratamiento de infecciones causadas por bacterias de importancia clínica, como también su aplicación en la conservación de alimentos.
Fuente de financiamiento
Apoyo del financiamiento del Vicerrectorado de Investigación - USAT y de los investigadores
Conflictos de intereses
Los autores declaramos no presentar conflictos de interés potenciales con respecto a la investigación, autoría y/o publicación de este artículo.
Agradecimientos
Los autores agradecen a las Universidad Católica Santo Toribio de Mogrovejo por el apoyo técnico, científico y logístico realizado a la presente investigación.
Consideraciones éticas
Se respetaron los principios éticos de la investigación científica, así como la conducta responsable de los investigadores y los principios universales de bioseguridad.
Aporte de los autores en el artículo
Orlando Pérez-Delgado, aportó con la obtención de los extractos, evaluación antibacteriana, análisis estadístico y su interpretación. Rosa Liliana Alvarado-Pineda, aportó con la redacción e interpretación de los resultados. Antero Enrique Yacarini-Martínez, aportó con la redacción y análisis de la discusión.
Literatura citada
1. Roca I, Akova M, Baquero F, Carlet J, Cavaleri M, Coenen S, et al. The global threat of antimicrobial resistance: science for intervention. New Microbes New infect 2015;6:22-9. DOI: https://doi.org/10.1016/j.nmni.2015.02.007 [ Links ]
2. Guo Y, Song G, Sun M, Wang J, Wang Y. Prevalence and therapies of antibiotic-resistance in Staphylococcus aureus. Front Cell Infect Microbiol 2020;10:107. DOI: https://doi.org/10.3389/fcimb.2020.00107 [ Links ]
3. Samadi R, Ghalavand Z, Mirnejad R, Nikmanesh B, Eslami G. Antimicrobial resistance and molecular characteristics of methicillin-resistant Staphylococcus aureus isolates from children patients in Iran. Infect Drug Resist 2019;12:3849-57. DOI: https://doi.org/10.2147/IDR.S229394 [ Links ]
4. Pachori P, Gothalwal R, Gandhi P. Emergence of antibiotic resistance Pseudomonas aeruginosa in intensive care unit; a critical review. Genes Dis 2019;6(2):109-19. DOI: https://doi.org/10.1016/j.gendis.2019.04.001 [ Links ]
5. Botelho J, Grosso F, Peixe L. Antibiotic resistance in Pseudomonas aeruginosa-Mechanisms, epidemiology and evolution. Drug Resist Updat 2019;44:26-47. DOI: https://doi.org/10.1016/j.drup.2019.07.002 [ Links ]
6. Dadi BR, Abebe T, Zhang L, Mihret A, Abebe W, Amogne W. Distribution of virulence genes and phylogenetics of uropathogenic Escherichia coli among urinary tract infection patients in Addis Ababa, Ethiopia. BMC Infect Dis 2020;20:108. DOI: https://doi.org/10.1186/s12879-020-4844-z [ Links ]
7. van Driel AA, Notermans DW, Meima A, Mulder M, Donker GA, Stobberingh EE, et al. Antibiotic resistance of Escherichia coli isolated from uncomplicated UTI in general practice patients over a 10-year period. Eur J Clin Microbiol Infect Dis 2019;38(11):2151-8. DOI: https://doi.org/10.1007/s10096-019-03655-3 [ Links ]
8. Odongo I, Ssemambo R, Kungu JM, Prevalence of Escherichia Coli and its antimicrobial susceptibility profiles among patients with UTI at Mulago Hospital, Kampala, Uganda. Interdiscip Perspect Infect Dis 2020;8042540. DOI: https://doi.org/10.1155/2020/8042540 [ Links ]
9. Coccimiglio J, Alipour M, Jiang ZH, Gottardo C, Suntres Z. Antioxidant, antibacterial, and cytotoxic activities of the ethanolic Origanum vulgare extract and its major constituents. Oxid Med Cell Longev 2016;2016:1404505. DOI: https://doi.org/10.1155/2016/1404505 [ Links ]
10. Brđanin S, Bogdanović N, Kolundžić M, Milenković M, Golić N, Kojić M, et al. Antimicrobial activity of oregano (Origanum vulgare L.) and Basil (Ocimum basilicum L.) extracts. Adv Tech 2015;4(2):5-10. DOI: https://doi.org/10.5937/savteh1502005B
11. Sakkas H. Papadopoulou C. Antimicrobial activity of basil, oregano, and thyme essential oils. J Microbiol Biotechnol 2017;27(3):429-38. DOI: https://doi.org/10.4014/jmb.1608.08024
12. García Beltrán JM, Espinosa C, Guardiola FA, Esteban MA. In vitro effects of Origanum vulgare leaf extracts on gilthead seabream (Sparus aurata L.) leucocytes, cytotoxic, bactericidal and antioxidant activities. Fish Shellfish Immunol 2018;79:1-10. DOI: https://doi.org/10.1016/j.fsi.2018.05.005 [ Links ]
13. Klūga A, Terentjeva M, Kántor A, Kluz M, Puchalski C, Kačániová M. Antibacterial activity of Melissa officinalis L., Mentha piperita L., Origanum vulgare L. and Malva mauritiana against bacterial microflora isolated from fish. Adv Res Life Sci 2017;1(1):75-80. DOI: https://doi.org/10.1515/arls-2017-0013 [ Links ]
14. Bulfon C, Volpatti D, Galeotti M. In vitro antibacterial activity of plant ethanolic extracts against fish pathogens. J World Aquac Soc 2014; 45(5):545-57. DOI: https://doi.org/10.1111/jwas.12151 [ Links ]
15. Akkauoi S, Johansson A, Yagoubi M, Haubek D, El hamidi A, Rida S, et al. Chemical composition, antimicrobial activity, in vitro cytotoxicity and leukotoxin neutralization of essential oil from Origanum vulgare against Aggregatibacter actinomycetemcomitans. Pathogens 2020;9(3): 192. DOI: https://doi.org/10.3390/pathogens9030192
16. Schovelin-H A, Muñoz-C M. Antibacterial effect of oregano infusion (Origanum vulgare) on in vitro growth of Streptococcus mutans, 2015. Int J Odontostomat 2018;12(4):337-42. DOI: https://doi.org/10.4067/S0718-381X2018000400337 [ Links ]
17. HaćSzymańczuk E, Cegiełka A, Karkos M, Gniewosz M, Piwowarek K. Evaluation of antioxidant and antimicrobial activity of oregano (Origanum vulgare L.) preparations during storage of low-pressure mechanically separated meat (BAADER meat) from chickens. Food Sci Biotechnol 2018;28(2):449-57. DOI: https://doi.org/10.1007/s10068018-0491-1 [ Links ]
18. Possamai MCF, dos Santos IC, Silva ES, Gazim ZC, Gonçalves JE, Soares AA, et al. In vitro bacteriostatic activity of Origanum vulgare, Cymbopogon citratus, and Lippia alba essential oils in cat food bacterial isolates. Semin Ciênc Exatas Tecnol 2019;40(6Supl2):3107-22. DOI: https://doi.org/10.5433/16790359.2019v40n6Supl2p3107 [ Links ]
19. Kozłowska M, Laudy AE, Przybył J, Ziarno M, Majewska E. Chemical composition and antibacterial activity of some medicinal plants from Lamiaceae family. Acta Pol Pharm 2015;72(4):757-67. [ Links ]
20. Oniga I, Pușcaș C, Silaghi Dumitrescu R, Olah NK, Sevastre B, Marica R, et al. Origanum vulgare ssp. vulgare: Chemical composition and biologicalsStudies. Molecules 2018;23(8):2077. DOI: http://doi.org/10.3390/molecules23082077
21. Boskovic M, Zdravkovic N, Ivanovic J, Janjic J, Djordjevic J, Starcevic M, et al. Antimicrobial activity of thyme (Tymus vulgaris) and oregano (Origanum vulgare) essential oils against some food-borne microorganisms. Procedia Food Sci 2015;5:18-21 DOI: https://doi.org/10.1016/j.profoo.2015.09.005 [ Links ]
22. Zazharskyi VV, Davydenko PO, Kulishenko OM, Borovik IV, Brygadyrenko VV. Antimicrobial activity of 50 plant extracts. Biosyst Divers 2019;27(2):163-169. DOI: https://doi.org/10.15421/011922 [ Links ]
23. Chuang LT, Tsai TH, Lien TJ, Huang WC, Liu JJ, Chang H, et al. Ethanolic extract of Origanum vulgare suppresses Propionibacterium acnes-induced inflammatory responses in human monocyte and mouse ear edema models. Molecules 2018;23(8):1987. DOI: https://doi.org/10.3390/molecules23081987 [ Links ]
24. Knez Hrnčič M, Cör D, Simonovska J, Knez Ž, Kavrakovski Z, Rafajlovska V. Extraction techniques and analytical methods for characterization of active compounds in Origanum species. Molecules 2020;25(20):4735. DOI: https://doi.org/10.3390/molecules25204735 [ Links ]
25. Blank DE, Corrêa RA, Freitag RA, Cleff MB, de Oliveira Hübner S. Anti-equine arteritis virus activity of ethanolic extract and compounds from Origanum vulgare. Semin Ciênc Exatas Tecnol 2017;38(2):759-64. DOI: https://doi.org/10.5433/16790359.2017v38n2p759 [ Links ]
26. Hernández R, Fernández C, Baptisita P. Meto-dología de la investigación. 6ta Edición. Mexico: Editorial McGraw-Hill Interamericana; 2014. 689 p. [ Links ]
27. Rodríguez Pava CN, Zarate Sanabria AG, Sánchez Leal LC. Actividad antimicrobiana de cuatro variedades de plantas frente a patógenos de importancia clínica en Colombia. NOVA 2017;15 (27):119-29. DOI: https://doi.org/10.22490/24629448.1963 [ Links ]
28. Alara OR, Abdurahman NH, Ukaegbu CI, Kab-bashi NA. Extraction and characterization of bioactive compounds in Vernonia amygdalina leaf ethanolic extract comparing Soxhlet and microwave-assisted extraction techniques . J Tai-bah Univ Sci 2019;13(1):414-22. DOI: https://doi.org/10.1080/16583655.2019.1582460 [ Links ]
29. Clinical and Laboratory Standards Institute. Methods for dilution antimicrobial susceptibility tests for bacteria that grow aerobically [Internet]. New York: West Valley Road: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2018 [cited 22 de October 2020]. 13 p. Recuperado a partir de: https://clsi.org/media/1928/m07ed11_sample.pdf
30. Balouiri M, Sadiki M, Ibnsouda SK. Methods for in vitro evaluating antimicrobial activity: A review. J Pharm Anal 2016;6(2):71-9. DOI: https://doi.org/10.1016/j.jpha.2015.11.005 [ Links ]
31. Jan S, Rashid M, Abd Allah EF, Ahmad P. Biological efficacy of essential oils and plant extracts of cultivated and wild ecotypes of Origanum vulgare L. Biomed Res Int 2020;2020:8751718. DOI: https://doi.org/10.1155/2020/8751718 [ Links ]
32. Moreno Mantilla MC. Efecto antibacteriano in vitro de extractos etanólicos de orégano, tomillo y salvia sobre cepas de Staphylococcus aureus, Escherichia coli y Pseudomonas aeruginosa con resistencia múltiple [tesis maestría]. [Lambayeque]: Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo; 2020. [citado 26 de octubre de 2020]. Recuperado a partir de: https://repositorio.unprg.edu.pe/handle/UNPRG/8421
33. Al-Joboury MA. Effect of crude extract of Origanum vulgare on the inhibition of some pathogenic bacteria and causing spoilage of food. Al-Anbar J Vet Sci 2015;8(2):28-33. [ Links ]
34. Neira-Llerena JE. Evaluación de la actividad antimicrobiana de los extractos etanólicos de las plantas medicinales utilizadas por los pobladores de Tuctumpaya, Quequeña y Chiguata, frente a bacterias gram positivas: Staphylococcus aureus - Streptococcus pneumoniae causantes de infecciones de importancia médica, Arequipa - Perú 2017. [tesis licenciatura]. [Arequipa]: Universidad Nacional San Agustín; 2018. [citado 26 de octubre de 2020]. Recuperado a partir de: http://repositorio.unsa.edu.pe/handle/UNSA/6899
35. Moghrovyan A, Sahakyan N, Babayan A, Chichoyan N, Petrosyan M, Trchounian A. Essential oil and ethanol extract of oregano (Origanum vulgare L.) from Armenian flora as a natural source of terpenes, flavonoids and other phytochemicals with antiradical, antioxidant, metal chelating, tyrosinase inhibitory and antibacterial ativity. Curr Pharm Des 2019;25(16):1809-16. DOI: https://doi.org/10.2174/1381612825666190702095612 [ Links ]
36. Fournomiti M, Kimbaris A, Mantzourani I, Plessas S, Theodoridou I, Kapsiotis I, et al. Antimicrobial activity of essential oils of cultivated oregano (Origanum vulgare), sage (Salvia officinalis), and thyme (Thymus vulgaris) against clinical isolates of Escherichia coli, Klebsiella oxytoca, and Klebsiella pneumoniae. Microb Eco Health Dis 2015;26:23289. DOI: https://doi.org/10.3402/mehd.v26.23289 [ Links ]
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Nota del Editor:
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