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Cuadernos Hospital de Clínicas

versión impresa ISSN 1562-6776

Resumen

AMARU, Ricardo et al. UMSAgen, método para la extracción simultánea de RNA y DNA para diagnóstico molecular. Cuad. - Hosp. Clín. [online]. 2008, vol.53, n.1, pp. 38-43. ISSN 1562-6776.

INTRODUCCIÓN El RNA y el DNA son materiales genéticos de la célula cuya extracción es útil para la medicina moderna. Actualmente existen varios métodos de extracción de RNA y DNA por separado y a costos altos. En este trabajo se describe el método UMSAgen como alternativa para la extracción simultanea de RNA total y DNA genómico para diagnósticos moleculares. MATERIAL Y MÉTODOS Se obtuvieron veinte muestras de médula ósea de pacientes con leucemia mieloide crónica. Los leucocitos fueron separados de los glóbulos rojos con tampón de lisis. Aproximadamente 3 x 106 de células fueron lisadas en guanidio y conservadas a -20 ºC hasta el momento de la extracción del RNA y DNA. Se realizaron extracciones con 3 diferentes métodos: a) El método comercial Quiagen para el RNA total, b) el método clásico fenol-cloroformo para el DNA genómico y c) el método UMSAgen para extracción simultanea de RNA y DNA. RESULTADOS La pureza del RNA total y DNA genómico extraídos por el método UMSAgen es similar a la extraída con el Kit Quiagen para el RNA y la técnica clásica para el DNA. La evaluación realizada por electroforesis en agarosa y la amplificación del daño molecular BCR-ABL y JAK-2 V617F, por RT-PCR y PCR respectivamente, fue exitosa. CONCLUSIÓN El método UMSAgen es una alternativa fácil y económica para la extracción de RNA total y DNA genómico en diagnóstico e investigación molecular.

Palabras clave : RNA; DNA; extracción; PCR; RT-PCR y electroforesis en agarosa.

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